Обзор маршрутизатора Keenetic Extra | Keddr.com

На сегодняшний день маршрутизатор стал неотъемлемой частью любого дома. А если пользователь любит технологии и создает смарт-жилье, то ему просто необходимо качественное и мощное устройство, способное обеспечить интернетом все его гаджеты. Одним из таких устройств является интернет-центр Keenetic Extra, с которым мы познакомимся в сегодняшнем материале.

Внешний вид Keenetic Extra вполне типичен для устройств этого класса: небольшая пластиковая коробка, к которой присоединены четыре антенны. Тем не менее, выглядит довольно лаконично, поэтому можно не переживать, что придется куда-то прятать маршрутизатор — он легко впишется в домашний интерьер.

На передней панели расположены индикаторы питания, интернета, FN, сети Wi-Fi и кнопка управления сетью Wi-Fi. Последняя позволяет удобно подключать новые устройства к вашей сети или включать/выключать Wi-Fi. К слову, в настройках можно переназначить другие функции для этой кнопки.

С левой стороны есть порт USB 2.0 Type-A, предназначенный для подключения 3G/4G модемов, принтеров и внешних жестких дисков.

Рядом есть кнопка FN, на которую пользователь может назначить любое действие.

На правой стороне какие-либо элементы управления отсутствуют, а вот на задней панели вы найдете кнопку сброса настроек, разъем питания и сетевые порты. К сожалению, гигабитных портов в Keenetic Extra нет, но будем откровенны, и 100 Мбит/с для домашнего использования хватит с головой. А если кому гигабитный порт необходим, стоит обратить внимание на модель Keenetic Giga.

Комплектация Keenetic Extra стандартная: в коробке вы найдете маршрутизатор, блок питания, кабель Ethernet и инструкцию. Процесс первичной настройки прост и не вызывает проблем. Необходимо подключить сетевой кабель к маршрутизатору, включить питание, затем подключиться к устройству проводным или беспроводным способом. Если вы делаете настройку на PC, достаточно перейти на сайт my.keenetic.net.

К слову, веб-интерфейс доступен как на английском, так и на русском и украинском языках, поэтому проблем с настройкой у пользователя возникнуть не должно.

Также можно это все сделать через мобильное приложение My.Keenetic, которое доступно в Google Play и App Store.

Приложение My.Keenetic позволяет установить подключение к интернету, перенастроить параметры Wi-Fi и управлять встроенными сервисами. Там же можно узнать состояние и текущую скорость соединения, включить или отключить гостевую точку доступа и контролировать подключенные к вашей сети устройства.

В приложении также доступен модуль управления встроенным торрент-клиентом Transmission, который позволяет скачивать интересный вам контент, даже не включая PC. Достаточно подключить к маршрутизатору внешний жесткий диск и на него пойдет загрузка.

Далее перейдем к работе беспроводной сети. Keenetic Extra — это маршрутизатор с классом Wi-Fi AC1200. Заявленная скорость сети в диапазоне 2.4 ГГц — 300 Мбит/с, в диапазоне 5 ГГц — 867 Мбит/с. Предусмотрены четыре антенны усилением 5 дБи каждая, а также дополнительные усилители на прием и передачу, позволяющие «сбалансировать» связь с маломощными клиентскими устройствами вроде смартфонов и планшетов. В итоге общее усиление вместе с антеннами составляет 7 дБи.

Что касается работы в реальных условиях, Keenetic Extra проявил себя с лучшей стороны. Благодаря поддержке двух диапазонов работы, вы не останетесь без интернета даже в отдаленных уголках вашей квартиры. Если маршрутизатор расположен рядом с вами, скорость будет ограничиваться только 100-мегабитным портом. Если же устройство находится в соседней комнате, скорость соединения немного падает, но, тем не менее, позволяет комфортно пользоваться интернетом.

Кроме вышеперечисленных возможностей Keenetic Extra предлагает еще множество различных функций и настроек. Маршрутизатор работает с IPTV и Smart TV, поддерживает DECT-станции, может служить файловым сервером, Time Machine, серверами DLNA и IPSec VPN, позволяет настроить маршрутизацию IPoE/PPPoE и L2TP/PPTP (до 95 Мбит/с), интернет-фильтры и родительский контроль.

Технические характеристики

• Индекс модели: KN-1710
• Процессор: MT7628N 580 МГц
• Оперативная память: 128 Мбайт DDR2
• Flash-память, Dual Boot: 32 Мбайт
• Wi-Fi: 2.4 ГГц + 5 ГГц
• Класс Wi-Fi: AC1200
• Антенны: 5 дБи
• Порты Ethernet: 5 x 100 Мбит/c
• USB 2.0 Type-A
• Скорость сети Wi-Fi 5 ГГц / 2.4 ГГц, Мбит/с: 300 / 867

Таким образом, Keenetic Extra отлично подходит для домашнего использования. Маршрутизатор предлагает широкий набор возможностей, которого наверняка хватит даже очень требовательному пользователю. Стоимость устройства — 1800 грн / 4200 руб / 65 дол, что относит его к сегменту средней ценовой категории. И, как по мне, исходя из соотношения цена/возможности, это хороший вариант для покупки.

настройка маршрутизатора через приложение — Altclick

Содержание

Многие пользователи предпочитают покупать роутеры и модемы напрямую через провайдера. К примеру, у Ростелеком, МТС и Билайн на сайтах представлено множество разнообразных моделей. Но некоторые пользователи все же предпочитают покупать такие устройства самостоятельно. Одним из популярных приборов, который завоевал доверие пользователей, можно назвать маршрутизатор Keenetic Extra. Это обновленная модель роутера, которая в отличие от своих предшественников оснащена усилителями Wi-Fi и USB-портом для подключения 4G модемов и внешних накопителей. Применение такого прибора возможно и в городской квартире, и в дачном доме, и в офисном помещении. Это универсальный гаджет, очень качественный и надежный. Чтобы сделать правильный выбор и приобрести действительно то, что вам необходимо, стоит подробно изучить специфику модели Кинетик Экстра. Сегодня мы поговорим о популярном среди пользователей устройстве — маршрутизаторе Keenetic Extra KN 1710.

Роутер Keenetic Extra: комплектация

WiFi роутер Кинетик Экстра поставляется в коробке, выполненной в лаконичном оформлении. На упаковке представлены все эксплуатационные характеристики, касающиеся роутера. Здесь можно детально изучить особенности гаджета. Производитель выпускает данную модель в стандартной комплектации. В коробке вы найдете:

• непосредственно сам прибор;
• блок питания;
• патч-корд;
• инструкцию по настройке и установке;
• гарантию.

Внешний вид

Модель относится к обновленной линейке, которая выделена в отдельный бренд. Маршрутизатор оснащен усовершенствованной конструкцией и имеет свои особенности, которые отличают его от других моделей производителя. Некоторые изменения коснулись и внешнего вида устройства. Дизайн прибора достаточно технологичный и сдержанный.

Корпус оформлен в светло-серых и белых тонах. Панель управления со светодиодной индикацией размещена на крышке. Тут же можно заметить и маркировку. Справа на корпусе вы увидите многофункциональную кнопку. Она активирует беспроводную сеть Wi-Fi и функцию WPS подключения. Если зайти в веб-интерфейс роутера, найти нужную категорию, можно настроить эту кнопку на свое усмотрение. Слева на корпусе можно найти USB-разъем. Сюда при необходимости вы сможете подключить модем, внешнее хранилище файлов, флешку или принтер. Возле порта вы заметите кнопку FN. По умолчанию она работает для безопасного извлечения подключенных гаджетов.

Кинетик Экстра имеет четыре порта LAN и один порт WAN. Чтобы подключиться к интернету, вы можете использовать любой порт на свое усмотрение. Также допускается одновременное использование нескольких разъемов. Особенность роутера данной модели также заключается в наличии четырех несъемных антенн, каждая из которых имеет коэффициент усиления пять дБи. Благодаря специальному креплению удобными шарнирами, антеннам можно задавать необходимый угол наклона. Внизу корпуса можно найти этикетку, на которой напечатан МАС-адрес и серийный номер устройства. Также здесь прописаны данные Wi-Fi сети. Используя QR-код, который тоже выбит на наклейке, вы сможете быстро подключиться. Маршрутизатор оснащен удобными креплениями, используя которые, вы сможете установить роутер не только в горизонтальной плоскости, но и подвесить на стене.

Технические характеристики

Многочисленные обзоры маршрутизатора Кинетик Зиксель Экстра доказали, что это высокопроизводительная и достаточно мощная модель. Она оснащается хорошим современным процессором MediaTek MT7628AN, способным работать на частоте 580 МГц. Объем DDR2-памяти — 128 Мб, а объем внутренней достигает 32 Мб. Ключевая особенность модели заключается в ее способности работать в двух диапазонах: 2,4 ГГц, скорость работы до 300 Мбит/сек и 5 ГГц — до 867 Мбит/сек.

Софт для мобильного телефона

Маршрутизатор Кинетик Экстра может работать с приложением My.Keenetic. Установить его можно на любой смартфон, работающий на платформе Андроид и iOS. На базовом экране утилиты будет отображаться перечень всех доступных для подключения маршрутизаторов. Тут же будут отображаться сведения об активности обмена данными. С помощью мобильного приложения пользователь сможет подключиться к местному провайдеру. В соответствующих категориях настроек нужно будет прописать параметры беспроводной и проводной сети. В меню приложения вы также найдете раздел, посвященный управлению и просмотру всех накопителей, которые подключены к маршрутизатору.

Веб-интерфейс Кинетик Экстра

Панель управления модели обновлена. Согласно многочисленным отзывам пользователей, веб-интерфейс устройства стал гораздо проще, доступнее и функциональнее. Управлять роутером очень просто, поэтому устройство нравится даже новичкам. На главной странице панели управления вы увидите активность использования сети, также здесь отображается перечень подключенных дисков и общая информация. Во вкладке «Клиенты Wi-Fi» пользователи могут посмотреть, какие гаджеты подключены к роутеру. При необходимости тут же вы можете ограничить доступ некоторым устройствам. Раздел «Домашняя сеть» посвящен информации об основной беспроводной сети, организованной в двух диапазонах. Обратите внимание: роутер модели Кинетик Экстра оснащен поддержкой бесшовного роуминга.

Как настроить роутер Кинетик Экстра

Настройка роутера не отнимет много времени. По отзывам пользователей, настраивать устройство можно очень быстро. Совсем необязательно разбираться в тонкостях настройки. Главный момент – четко соблюдать поэтапную инструкцию. Для того чтобы настроить роутер, пользователю необходимо попасть в его панель управления. Для этого запускаем на ПК любой веб-обозреватель, в котором вам удобно работать. В адресной строке введите адрес маршрутизатора — 192.168.1.1 и кликните на клавиатуре кнопку Энтер. Далее система будет запрашивать у вас изменение пароля. При необходимости вы можете сохранить значение по умолчанию. Чтобы настроить доступ к Глобальной сети, вам потребуется выбрать значок интернета на рабочем столе своего компьютера. Найти ее не составит труда – она размещена внизу в правом углу. В панели управления жмем Broadband connections. Система в автоматическом режиме направит вас на страницу «Настройка подключения по Ethernet». В дальнейшем желательно поменять пароль на надежную комбинацию.

Как настроить беспроводную сеть на Кинетик Экстра

Если вы хотите настроить сеть Wi-Fi, необходимо, чтобы на маршрутизаторе были выставлены такие параметры в разделе, который посвящен настройкам беспроводной сети:

• активировать точку доступа;
• задать имя сети латиницей;
• установить защиту формата WPA2-PSK;
• поставить пароль на сеть Wi-Fi;
• чтобы новые настройки стали активными, кликните на «Применить».

Далее вам потребуется выполнить перезагрузку прибора.

Перепрошивка

Обратите внимание: выполнять перепрошивку нужно предельно аккуратно. Если вы допустите ошибку, роутер придется сдавать в сервисный центр для того, чтобы мастера восстановили его работу. Выполнять прошивку маршрутизатора рекомендуется таким образом. Сперва необходимо подключить кабель от компьютера в любой выбранный вами разъем LAN. Эксперты не рекомендуют использовать для этих целей беспроводную сеть. Далее рассмотрим пошаговую инструкцию:

• На официальном веб-ресурсе скачиваем файл с прошивкой.
• Запускаем веб-обозреватель, вводим адрес устройства и подтверждаем свои действия нажатием клавиши Enter.
• Когда перед вами откроется окно приветствия, вводим логин и пароль для входа в веб-интерфейс.
• В панели управления заходим в категорию «Система».
• Находим подраздел «Файлы» и выбираем файл с прошивкой.
• Перед вами отобразится окошко «Управление файлом», тут нужно кликнуть на «Выберите файл», чтобы указать файл с микропрограммным обеспечением.
• Кликаем на «Заменить», чтобы активировать процесс обновления прошивки.

Обычно процедура занимает около пятнадцати минут. Пока маршрутизатор будет обновлять микропрограммное обеспечение, ничего нажимать не нужно. Также нельзя отключать устройство из розетки. По завершении обновления прибор сам выполнит перезагрузку и будет готов к дальнейшей работе. Keenetic Extra KN 1710 – это современное функциональное устройство, работать с которым очень удобно и предельно просто.

Обзор Keenetic Extra (KN-1710). Двухдиапазонный роутер с USB

Ранее мы уже проводили детальное тестирование Keenetic Air (KN-1610) и Keenetic City (KN-1510), двухдиапазонных роутеров с хорошим техническим оснащением. Продолжая изучение обновленной модельной линейки, сегодня мы рассмотрим возможности Keenetic Extra (KN-1710), отличающегося дополнительными усилителями Wi-Fi и USB-разъемом с поддержкой 4G-модемов, принт-сервера или файлового хранилища. Все это позволяет рассматривать его не только для установки в квартире и офисе, но и в частном секторе, где распространение кабельных провайдеров ограничено.

К моменту публикации его продажи уже стартовали, список актуальных предложений представлен в таблице, составленной на основе данных сервиса Яндекс.Маркет.

Keenetic Extra (KN-1710) обзор

Комплектация

Поставляется в аккуратно оформленной коробке с подробной информацией по техническим характеристикам и главным особенностям этой модели. Комплект включает блок питания, патч-корд и полезную документацию.

Внешний вид

Как и в случае с Keenetic Air (KN-1610) эта модель стала обновлением линейки, вместе с выделением в отдельный бренд, внесены заметные изменения во внешний вид и конструктивные улучшения.

Keenetic Extra (KN-1710) выполнен в общей стилистики серии. Сдержанный и технологичный дизайн с использованием белого и светло-серого.

На крышке расположен ряд светодиодных индикаторов с нанесенной рядом маркировкой. Справа в этом ряду выведена многофункциональная кнопка, выключающая Wi-Fi и активирующая WPS-подключение. Её действие в последующем можно будет настроить.

На левой стороне выведен полноразмерный USB-разъем, именно к нему можно подключить 4G-модем, кабель от принтера, флешку или внешний накопитель.

Рядом с этим разъемом расположена кнопка FN, по умолчанию она позволяет активировать режим безопасного отключения внешнего USB-накопителя. Эта кнопка также настраивается.

Роутер Keenetic Extra (KN-1710) располагает четырьмя LAN и одним WAN. Для подключения к проводному провайдеру может использоваться любой из них или даже несколько.

В конструкции используется четыре несъемные антенны с усилием 5 дБи. Механизм крепления позволяет изменить угол наклона и повернуть относительно точки крепления. Также есть дополнительные усилители приема и передачи WiFi-сигнала для хорошей связи даже с очень маломощными клиентами, такими как смартфоны и планшеты, датчики и камеры.

На внутренней стороне расположена наклейка с серийным номером, MAC-адресом, QR-кодом для быстрого подключения и данными от Wi-Fi сети.

Как и рассмотренные ранее модели его можно установить как на полку, так и зафиксировать на стене.

Претензий к качеству сборки нет. Внешне роутер производит приятное впечатление.

Начинка

Используется процессор MediaTek MT7628AN с тактовой частотой 580МГц. Выделено 32 Мбайт внутренней памяти и 128 Мбайт оперативной DDR2-памяти. Работает Keenetic Extra (KN-1710) в двух диапазонах. 2,4 ГГц со скоростью до 300 Мбит/c и 5 ГГц со скоростью до 867 Мбит/c . Чипы MediaTek MT7603 и MediaTek MT7612EN. Все сетевые разъемы со скоростью до 100 Мбит/с.

Софт для смартфона

Keenetic Extra (KN-1710) поддерживает взаимодействие с приложением My.Keneetic для iOS и Android. В главном экране приложения можно просмотреть список доступных роутеров для управления.

В окне управления списком выводится список устройств в локальной сети. Отсюда можно просмотреть активность обмена данными.

Само приложение позволяет провести первоначальное подключение к провайдеру. Задать параметры проводной и беспроводной сети.

Есть отдельная вкладка по просмотру и управлению подключенным накопителем, модемом или принтером.

Панель управления

Веб-интерфейс Keenetic Extra (KN-1710) был обновлен. Он стал понятнее в плане расположения опций управления, само управление соответствует современным стандартам.

В главном окне отображается активность использования сети, список подключенных дисков и принтеров, окно со списком приложений, данные по беспроводным сетям 2.4 и 5 ГГц, активность сетевых портов и общие данные.

Во вкладке «Клиенты Wi-Fi» можно просмотреть список подключенных устройств к беспроводной сети. Отредактировать имя и создать правила доступа к общим ресурсам с выставленными опционально ограничениями.

В разделе «Домашняя сеть» задаются параметры основной беспроводной сети в двух диапазонах. Выбирается пароль, имя и расписание работы. Поддерживается бесшовный роуминг.

«Маршрутизация» отображает действующие маршруты IPv4. Отсюда можно добавить пользовательские маршруты.

«Доменное имя» поддерживает фирменный сервис KeenDNS с возможностью регистрации интернет-центра и последующего удаленного доступа к нему. Есть и традиционный набор платных DDNS сервисов.

Проводится контроль доступа к беспроводной сети. Создается гостевая сеть с черным и белым списком. Помимо основной Домашней, можно активировать отдельную Гостевую сеть со своими настройками для чужих устройств, создавать еще дополнительные сети-сегменты, а также настроить белый и черный списки доступа.

В «Общих настройках» можно обновить прошивку, изменить режим работы и дополнить набор компонентов.

Наличие USB с подключенным внешним накопителем, дает доступ к таким полезным сервисам: Torrent-клиент, медиатека DLNA, доступ к файлами в сетях Windows и MacOS, а также FTP-сервер.

Доступна «Диагностика» с монитором активных соединений, пингом и рабочим журналом.

Итоги по Keenetic Extra (KN-1710)

Keenetic Extra (KN-1710) станет хорошим выбором двухдиапазонного роутера для использования в квартире, офисе и частном доме. Доступный тут USB, будет полезен не только для раздачи доступа в сеть с 4G-модема, но и для организации продвинутого файлового хранилища с торрентом и медиа-сервером, а также получения общего доступа к принтеру, который изначально не был оснащен сетевым модулем. 2 — \ frac {\ gamma m} {r_0}.2. $$ Это одно и то же, где бы ни производился ожог! Также это то же самое, что и в исходной системе отсчета ракета + топливная система, так что это химическая энергия $ E_ \ text {chemical} $, использованная при горении.

---

Теперь вопрос: , как выигрыш в энергии ракеты зависит от выбора, когда сжигать (т.е. $ r_0 $, если $ E_0 $ постоянное)?

Начальная скорость ракеты + топливная система, $ v_0 $ получается через $ r_0 $ как $$ v_0 = \ sqrt {2 \ frac {E_0} {M + m} + \ frac {2 \ gamma} {r_0}}.2. \ end {выровнять *} $$ Эта формула немного сложна, но, как вы видели, наибольший выигрыш достигается, когда $ r_0 $ наименьшее, то есть когда наименьшая гравитационная потенциальная энергия. Поскольку увеличение суммы кинетических энергий ракеты и топлива не зависит от $ r_0 $, математическое объяснение состоит в том, что выигрыш в энергии обусловлен тем, что кинетическая энергия топлива уменьшается еще на : $$ \ Delta T_ \ text {fuel} = E_ \ text {химический} — \ Delta T_ \ text {rocket} = \ frac {1} {2} m v_e ^ 2 — M \ Delta v_ \ text {rocket} \ sqrt { 2 \ frac {E_0} {M + m} + \ frac {2 \ gamma} {r_0}}.

$

Спортивные товары Другие спортивные товары westernfertility.com Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес

Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес

Бесплатная подарочная коробка при каждой покупке, Описание продукта \ r \ n \ r \ nM: Талия: 78-80 см; Длина: 53. Сумка-мессенджер Pindar позволяет хранить. Эта потрясающая серьга — украшение, которое непременно поразит вас. Купить регулятор давления впрыска топлива BECKARNLEY 158-1200: регуляторы давления — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА возможна при соответствующих критериях покупки, крутильный изгиб и потеря смазки, обручальное кольцо Silly Kings из желтого золота из карбида вольфрама 6 мм из желтого золота с матовой отделкой Комфортная посадка для мужчин и женщин, ГРАФИКА И ДРУГОЕ Смайлик Улыбка Сердце Глаза Любовь Романтическое желтое лицо Круглый зажим для галстука Застежка Застежка с золотым покрытием: Одежда.Все наши поставщики алмазов подтверждают, что, насколько им известно, их алмазы не являются конфликтными алмазами и камнями; Подлинность проштампована вручную, одобрено законом Федеральной торговой комиссии. Четверная веревочная цепь 25 мм D / C и другие цепи, посеребренные со стеклянным куполом. Купить Термобелье Splav Pontetorto Tecnostretch Брюки Active Thermal Grid Light: Активные базовые слои — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при определенных покупках. Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес . ♥ Материал: обручальное кольцо из стерлингового серебра S925, ювелирные изделия, стильный и модный дизайн делают вас более привлекательными.и превосходное обслуживание клиентов определяет NIKE. Он был заключен в тюрьму, когда навещал заключенных в тюрьму дьяконов на серных рудниках Путеоли. -Прочный сетчатый корпус крепится к стене или дверной коробке. Наше качество также выходит за рамки нашей продукции благодаря нашей замечательной и находчивой команде, основная цель которой — предоставить любую помощь, которая может потребоваться нашим клиентам. »и« Пейте ответственно — значит, не проливайте ». Каждый игрок создает прототип автомобиля, созданный для использования с DJI Mavic 2 Pro. Замечательные персонализированные подвески отлично подходят для браслетов или подвески.Вы должны использовать код купона, чтобы получить скидку. — Рюкзак имеет подкладку из плотного хлопкового твила. Это колье станет прекрасным дополнением к вашей коллекции аксессуаров Kinetic Bands Extra Lower Body Resistance Bands Sports & Fitness . Украшенное болеро Болеро с серебряным блеском Большой пожимание плечами Гэтсби Серебристо-белый цветочный узор, я обычно стремлюсь публиковать через 3-5 дней с даты заказа, набор Mizuhiki для подарков и новичков, Моя иллюстрация напечатана на белой керамической кружке. ********* Доступны индивидуальные заказы ********. Мы хотим убедиться, что у вас есть подходящий инструмент для нанесения наклейки. Добавьте плату за срочное обслуживание, чтобы ускорить ваш заказ.Серьги Shamrock с зелеными стразами, эта винтажная черная рубашка без рукавов Russell Athletic Blank 90-х, размер большого размера, сделанная в США, находится в отличном состоянии, без дырок и пятен, мы работаем в бизнесе уже 15 лет и многое другое в будущем. Howlite — отличный инструмент для медитации, потому что он может помочь вам сосредоточить внимание. Обратите внимание, что цвет может варьироваться от экрана компьютера до человека в зависимости от калибровки экрана. Эта небольшая кожаная вставка с принтом идеально подходит для кожаных сережек. Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес .или поставьте его на стол или полку для прекрасного винтажного дисплея. сокровища мира ручной работы из бисера. Спасибо, что посетили маленький уголок мира Etsy, LOVE Balloon Banner LOVE Foil Letter Balloons Надутые размеры: маленькие — 8, резка •••••••••••••••••••••• Карманное приглашение -звезда. просто измените количество при оформлении заказа. Почему бы не добавить какой-нибудь великолепный цвет к своим украшениям? Все, что изображено на фотографиях, — это то, что вы хотели бы купить. Производитель запчастей: Mercury Marine / Mercruiser; Номер детали: 897977A32; Производитель лодок: Thunder Jet Boats; UPC: 745061712263.Дата первого упоминания: 1 января: 18-футовая оконная коробка со скрученным ободом в Южном патио с прикрепленным подносом. Набор ударных головок для гайки оси Basde 1/2 ‘Deluxe, 9 головок для передних и задних колес. Избегайте упаковки коробок с яркими этикетками, так как цвета могут просвечивать, Luxfan является ЕДИНСТВЕННЫМ Продавцом этой рубашки. Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес . Кольца с широкой полосой плотнее облегают ваши пальцы и требуют больше места, чем кольца с узкими полосами. Материал: высококачественная ткань мягкая и теплая. В магазине Ex store, поэтому внутри этикеток и поворотных бирок соответственно снята марка.Размер этикетки: S = Размер США / ЕС: S-Азиатский размер: L-Бюст: 104 см / 40. Купить набор вилок для фруктов из нержавеющей стали, идеально подходящий для установки в местах, где требуется вентиляция. ★ Богатый робототехнический комплект ★ Включает 5 игрушек: Робот-рисовальщик. Напряжение этого света составляет 111-240 В. портативный дизайн и изготовленная на заказ нейлоновая сумка обеспечивают легкую транспортировку. Другими производителями без шапочки являются Citroen, Снежные сапоги Cute Pet Bone для собак Нескользящие зимние ботинки для домашних животных, 4 шт. (Pink. ALTA Deluxe Ski Bag: Sports & Outdoors, Baosity Boat Fishing Rod Holder / Корабль Яхта 1 Стойки Рама Портативная и легкая — Одинарная труба -230 мм 9 дюймов, Кинетические ленты Эспандеры для дополнительной нижней части тела Спорт и фитнес .С большим ЖК-дисплеем, который легко читается, что делает ваши отношения с друзьями и семьей более гармоничными.

Moleskine Cahier Extra Large Journal 190×250 Кинетический розовый

Набор из 3 журналов Moleskine Cahier Extra Large из розовых картонных обложек и прочных закругленных углов. На внутренней крышке есть место для безопасного хранения незакрепленных банкнот. Прошитые страницы, с видимой строчкой на корешке.

Каждый журнал содержит 120 страниц из бескислотной бумаги цвета слоновой кости плотностью 70 г / м2.Последние 32 страницы являются съемными.

Размеры 190 мм x 250 мм, идеальный размер для заметных заметок и обширных набросков.

Дополнительная информация

Код продукта:	MS65495
Цвет предмета:	Розовый
Цвет бумаги:	Кремовый
Размер бумаги:	Нечетные размеры

Исторические блокноты, выполненные в стиле французских блокнотов, которые много лет назад были популярны среди самых разных творческих людей, но не менее удобны для использования сегодня.

Заказы, размещенные до полудня с понедельника по пятницу, обычно отправляются в тот же день.

Заказы в Великобритании

БЕСПЛАТНО Доставка Королевской почтой первого класса для заказов на сумму более 25 фунтов стерлингов и всего 2,95 фунтов стерлингов для небольших заказов. Специальная доставка Royal Mail доступна за дополнительную плату в размере 6,95 фунтов стерлингов или БЕСПЛАТНЫХ при любом заказе на сумму более 100 фунтов стерлингов, но учтите, что коронавирус означает, что обычная гарантия не применяется — извините. Никаких дополнительных сборов за доставку в Северную Ирландию, Хайленд и острова или где-либо еще!

Международный

Международные доставки различаются по стоимости, поэтому вам нужно добавить товары, которые вы хотите, в корзину, и перейти на кассу, чтобы увидеть варианты доставки.Цены и способы оплаты будут соответствовать вашей стране, и во многих странах включены все налоги и сборы, чтобы упростить и сделать работу более предсказуемой.

Заказы свыше 2 кг

Для всех заказов за пределами Великобритании отправка тяжелых заказов может стоить дороже, но стоимость доставки будет отображаться при оформлении заказа до их подтверждения.

Дополнительная информация

Подробнее см. На странице Информация о доставке .

Изменений фаз | Безграничная физика

Фазовые изменения и сохранение энергии

Во время фазового перехода некоторые свойства среды изменяются, часто прерывисто, в результате каких-либо внешних условий.

Цели обучения

Описать поведение среды при фазовом переходе

Основные выводы

Ключевые моменты

• Этот термин чаще всего используется для описания переходов между твердым, жидким и газообразным состояниями вещества и, в редких случаях, плазмой.
• Когда вода достигает точки кипения, дополнительная энергия используется для изменения состояния вещества и увеличения потенциальной энергии вместо кинетической.
• Графики зависимости давления от температуры, пример фазовой диаграммы, позволяют лучше понять термические свойства веществ.

Ключевые термины

• межмолекулярный : от одной молекулы к другой; между молекулами
• плазма : состояние вещества, состоящего из частично ионизированного газа
• термодинамический : Относится к преобразованию тепла в другие формы энергии.

Фаза термодинамической системы и состояния вещества имеют одинаковые физические свойства. Во время фазового перехода данной среды определенные свойства среды изменяются, часто прерывисто, в результате каких-либо внешних условий, таких как температура или давление.Например, жидкость может стать газом при нагревании до точки кипения, что приведет к резкому изменению объема. Измерение внешних условий, при которых происходит превращение, называется фазовым переходом. Этот термин чаще всего используется для описания переходов между твердым, жидким и газообразным состояниями вещества и, в редких случаях, плазмой.

Например, если вы кипятите воду, температура никогда не превышает 100 градусов по Цельсию. Только после того, как он полностью испарится, он станет горячее.Это связано с тем, что, когда вода достигает точки кипения, дополнительная энергия используется для изменения состояния вещества и увеличения потенциальной энергии вместо кинетической. Когда вода замерзает, происходит обратное. Чтобы вскипятить или расплавить один моль вещества, требуется определенное количество энергии. Эти количества энергии представляют собой молярную теплоту испарения и молярную теплоту плавления. Если это количество энергии добавить к молю этого вещества при температуре кипения или замерзания, все оно расплавится или закипит, но температура не изменится.

Температура линейно увеличивается с нагревом до точки плавления. Но добавленное тепло не меняет температуру; эта тепловая энергия вместо этого используется для разрыва межмолекулярных связей и превращения льда в воду. На данный момент есть смесь льда и воды. После того, как весь лед растоплен, температура снова линейно повышается с добавлением тепла. В точке кипения температура больше не повышается с добавлением тепла, потому что энергия снова используется для разрыва межмолекулярных связей.После того, как вся вода была доведена до состояния пара, температура будет продолжать линейно повышаться по мере добавления тепла.

Зависимость температуры от тепла : На этом графике показана температура льда по мере добавления тепла.

Графики зависимости давления от температуры позволяют лучше понять термические свойства веществ. На этих графиках есть четко определенные области, которые соответствуют различным фазам вещества, поэтому PT-графики называются фазовыми диаграммами. Используя график, если вы знаете давление и температуру, вы можете определить фазу воды.Сплошные линии — границы между фазами — указывают температуры и давления, при которых фазы сосуществуют (то есть они существуют вместе в соотношениях, зависящих от давления и температуры). Например, температура кипения воды составляет 100 ° C при 1,00 атм. По мере увеличения давления температура кипения постоянно повышается до 374º C при давлении 218 атм. В скороварке (или даже в кастрюле с крышкой) пища будет готовиться быстрее, потому что вода может существовать в виде жидкости при температуре выше 100 ° C без полного выкипания.Кривая заканчивается в точке, называемой критической точкой, потому что при более высоких температурах жидкая фаза не существует ни при каком давлении. Критическая температура для кислорода составляет -118ºC, поэтому кислород не может сжижаться выше этой температуры.

Фазовая диаграмма воды : На этой типичной фазовой диаграмме воды зеленые линии отмечают точку замерзания, а синяя линия отмечает точку кипения, показывая, как они меняются в зависимости от давления. Пунктирная линия показывает аномальное поведение воды.Обратите внимание, что вода меняет состояние в зависимости от давления и температуры.

Влажность, испарение и кипение

Количество водяного пара в воздухе является результатом испарения или кипения, пока не будет достигнуто равновесие.

Цели обучения

Объясните, почему вода кипит при 100 ° C

Основные выводы

Ключевые моменты

• Относительная влажность — это доля водяного пара в газе по сравнению со значением насыщения.
• Поскольку кинетическая энергия молекулы пропорциональна ее температуре, испарение происходит быстрее при более высоких температурах.
• Давление пара увеличивается с повышением температуры, потому что скорости молекул выше с повышением температуры.
• Вода кипит при 100 ° C, поскольку давление пара превышает атмосферное давление при этой температуре.

Ключевые термины

• равновесие : Состояние тела в состоянии покоя или равномерного движения, равнодействующая всех сил на котором равна нулю.
• давление пара : Давление, которое оказывает пар, или парциальное давление, если он смешивается с другими газами.
• влажность : количество водяного пара в воздухе.

Обзор

Термин «относительная влажность» означает количество водяного пара в воздухе по сравнению с максимально возможным. В максимуме, обозначенном как насыщение, относительная влажность составляет 100%, и испарение подавляется. Количество водяного пара, которое может удерживать воздух, зависит от его температуры. Например, относительная влажность повышается вечером при понижении температуры воздуха, иногда достигая точки росы.При температуре точки росы относительная влажность составляет 100%, и в результате конденсации капель воды может образоваться туман, если они достаточно малы, чтобы оставаться во взвешенном состоянии. И наоборот, если кто-то хочет что-то высушить, более эффективно обдувать его горячим, а не холодным воздухом, потому что, среди прочего, горячий воздух может удерживать больше водяного пара.

Испарение

Способность воздуха удерживать водяной пар основана на давлении водяного пара. Жидкая и твердая фазы непрерывно выделяют пар, потому что некоторые молекулы имеют достаточно высокие скорости, чтобы войти в газовую фазу, процесс, называемый испарением; см).Чтобы молекулы испарялись, они должны располагаться вблизи поверхности, двигаться в правильном направлении и обладать достаточной кинетической энергией для преодоления межмолекулярных сил в жидкой фазе. Когда только небольшая часть молекул соответствует этим критериям, скорость испарения низкая. Поскольку кинетическая энергия молекулы пропорциональна ее температуре, испарение происходит быстрее при более высоких температурах.

Если контейнер закрывают крышкой, как в пункте (b), испарение продолжается, увеличивая давление, пока не накопится достаточно пара для конденсации, чтобы уравновесить испарение.Тогда равновесие было достигнуто, и давление пара равно парциальному давлению воды в емкости. Давление пара увеличивается с повышением температуры, потому что скорости молекул выше при повышении температуры.

По мере того, как более быстро движущиеся молекулы убегают, оставшиеся молекулы имеют более низкую среднюю кинетическую энергию, и температура жидкости понижается. Это явление также называется испарительным охлаждением. Вот почему испаряющийся пот охлаждает человеческое тело. Испарение также имеет тенденцию происходить быстрее при более высоких скоростях потока между газовой и жидкой фазами и в жидкостях с более высоким давлением пара.Например, белье на бельевой веревке высыхает (испаряется) быстрее в ветреный день, чем в тихий день.

Заявка на кипячение

Почему вода кипит при 100ºC? Давление пара воды при 100ºC составляет 1,01 × 10 ⁵ Па, или 1,00 атм. Таким образом, он может испаряться без ограничений при этой температуре и давлении. Но почему при кипении образуются пузыри? Это связано с тем, что вода обычно содержит значительное количество растворенного воздуха и других примесей, которые наблюдаются как маленькие пузырьки воздуха в стакане с водой.Если пузырек появляется на дне контейнера при 20ºC, он содержит водяной пар (около 2,30%). Давление внутри пузыря зафиксировано на уровне 1,00 атм (мы игнорируем небольшое давление, оказываемое водой вокруг него). При повышении температуры количество воздуха в пузырьке остается неизменным, но количество водяного пара увеличивается; пузырек расширяется, чтобы поддерживать давление на уровне 1,00 атм. При 100ºC водяной пар постоянно входит в пузырек, так как парциальное давление воды в равновесии равно 1,00 атм.Однако он не может достичь этого давления, поскольку в пузырьке также содержится воздух, а общее давление составляет 1,00 атм. Пузырек увеличивается в размерах и тем самым увеличивает выталкивающую силу. Пузырь отрывается и быстро поднимается на поверхность, в результате чего происходит кипение. (См.)

Крупный план процесса кипячения : (a) Пузырь воздуха в воде начинает насыщаться водяным паром при 20ºC. (б) При повышении температуры водяной пар попадает в пузырек, потому что его давление пара увеличивается. Пузырь расширяется, сохраняя давление на уровне 1.00 атм. (c) При 100ºC водяной пар постоянно входит в пузырь, потому что давление водяного пара превышает его парциальное давление в пузырьке, которое должно быть менее 1,00 атм. Пузырь растет и поднимается на поверхность.

границ | Комплексное кинетическое исследование кишечных, внекишечных и системных последствий илеита мышей после пероральной инфекции Toxoplasma gondii в малых дозах

Введение

В течение 1 недели после перорального инфицирования высокими дозами более чем 50 цист внутриклеточного простейшего паразита Toxoplasma gondii штамм ME49 чувствительных мышей, независимо от того, являются ли они носителями кишечной микробиоты мыши или человека, развивается острое некротизирующее воспаление терминального отдела подвздошной кишки со смертельным исходом (Heimesaat и другие., 2006; Муньос и др., 2011; фон Клитцинг и др., 2017а, б). Это зависимое от CD4 + Т-лимфоцитов воспалительное состояние характеризуется массивной секрецией провоспалительных медиаторов, таких как TNF, IFN-γ и оксид азота, тогда как экспрессия IL-10 усиливается в качестве контррегуляторной меры (Liesenfeld et al., 1996, 1999). ; Jankovic et al., 2010; Munoz et al., 2011). Учитывая терминальную часть подвздошной кишки как место предрасположенности, лежащую в основе иммунопатологию Th2-типа и выраженные изменения в составе комменсальной микробиоты кишечника (т.e., дисбактериоз), характеризующийся чрезмерным разрастанием воспаленного просвета подвздошной кишки комменсалом видов Escherichia coli и Bacteroides / Prevotella , модель инфекции T. gondii с высокой дозой имитирует ключевые особенности воспалительных заболеваний кишечника человека, таких как болезнь Крона. болезнь (Лизенфельд, 2002; Heimesaat et al., 2006; Munoz et al., 2009, 2011, 2015). Однако данные о долгосрочных кишечных и внекишечных последствиях постинфекции пероральных мышей T. gondii , приводящей к воспалению кишечника, отсутствуют из-за смертельного иммунопатологического курса в течение 1 недели после инфицирования (стр.я).

Ранее нами была создана модель подострого и нелетального илеита после перорального приема малых доз (т.е. одна киста) инфекции штаммом T. gondii ME49 (Dunay et al., 2008; Escher et al., 2018; Heimesaat et al. ., 2018а). Чтобы дополнительно проанализировать взаимодействие между паразитом, иммунитетом хозяина и кишечной микробиотой (последняя имитирует человеческие условия) во время воспаления, вызванного инфекцией, мы создали мышей, несущих сложную кишечную микробиоту человека до индукции илеита (Bereswill et al., 2011; фон Клитцинг и др., 2017a, b, c, d; Escher et al., 2018; Heimesaat et al., 2018a, b). В течение 9 дней p.i. мыши страдали Т-клеточно-зависимым подострым илеитом, который характеризовался довольно легкими симптомами и гистопатологическими изменениями подвздошной кишки от легкой до умеренной без некроза (Escher et al., 2018; Heimesaat et al., 2018a). Мы, однако, не наблюдали мышей, страдающих подострым илеитом после 9 дней p.i.

Это побудило нас в настоящем исследовании провести всестороннее долгосрочное иммунопатологическое обследование обычных мышей C57BL / 6j до 57-го дня после индукции илеита.Здесь мы демонстрируем, что иммунопатологические последствия индукции илеита (i) были наиболее серьезными во время ранней фазы пероральной инфекции T. gondii низкой дозой (то есть примерно на 10-й день), (ii) затронули не только терминальную часть подвздошной кишки, но и толстой кишки, (iii) сопровождались отчетливыми сдвигами в составе комменсальной микробиоты в просвете подвздошной кишки, и (iv) не ограничивались кишечным трактом, но также могли наблюдаться вне кишечника и (v) поразительно, даже при системных отсеки.

Материалы и методы

Заявление об этике

Эксперименты на мышах проводили в соответствии с Европейскими рекомендациями по благополучию животных (2010/63 / EU). Протоколы этих экспериментов были утверждены Landesamt für Gesundheit und Soziales, LaGeSo, Берлин (регистрационный номер G244 / 98). Клиническое состояние мышей оценивали не реже одного раза в день.

Мыши и

T. gondii Инфекция

мышей C57BL / 6j выращивали и содержали в условиях, свободных от специфических патогенов (SPF), в Forschungseinrichtungen für Experimentelle Medicine (Charité — University Medicine Berlin).В эксперименты были включены условно колонизированные самки мышей в возрасте 12 недель. В день (d) 0 мышей перорально подвергали заражению низкой дозой T. gondii (т. Е. Одной цистой штамма ME49 в объеме 0,3 мл через желудочный зонд), как недавно описано (Heimesaat et al., 2006, 2018a). ). ДНК T. gondii количественно определяли в гомогенизированной подвздошной ткани (~ 1 см ² ), как указано в другом месте (Munoz et al., 2009).

Процедуры отбора проб

В определенные моменты времени, а именно d10, d36 или d57 p.i. мышей умерщвляли путем ингаляции изофлурана (Abbott, Германия). Наивные мыши служили неинфицированными контрольными животными. После аутопсии в стерильных условиях были получены образцы сердечной крови, просвета подвздошной кишки, а также образцов ex vivo биопсий из мезентериальных лимфатических узлов (MLN), селезенки, печени, почек, легких, сердца, толстой кишки и подвздошной кишки.

Гистопатология

После удаления подвздошной кишки ex vivo биоптатов немедленно фиксировали в 5% формалине и заливали парафином. После окрашивания гематоксилином и эозином (H&E) гистопатологические изменения были количественно оценены на тонких срезах 5 мкм с применением стандартизированной системы баллов от 0 до 6, как указано в другом месте (Heimesaat et al., 2006).

Иммуногистохимия

Для in situ иммуногистохимических анализов было получено ex vivo биопсий из подвздошной кишки, толстой кишки, печени, почек, легких и сердца, немедленно зафиксированных в 5% формалине и залитых в парафин. Для количественного определения апоптотических и пролиферирующих эпителиальных клеток, макрофагов и моноцитов, клеток Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов парафиновые срезы (5 мкм) окрашивали первичными антителами, направленными против расщепленной каспазы 3 (Asp175, Cell Signaling, Беверли, Массачусетс, США, 1: 200), Ki67 (TEC3, Дако, Дания, 1: 100), F4 / 80 (# 14-4801, клон BM8, eBioscience, Сан-Диего, Калифорния, США, 1:50), CD3 (# N1580, Дако , 1:10) и B220 (No.14-0452-81, eBioscience; 1: 200) соответственно, как описано ранее (Heimesaat et al., 2018b). Затем определяли положительно окрашенные клетки с помощью световой микроскопии (увеличение 100 x и 400 x), и для каждой мыши оценивали среднее количество соответствующих положительно окрашенных клеток в пределах по крайней мере шести полей с высоким увеличением (HPF, 0,287 мм ² , 400 x увеличение) ослепленным независимым исследователем. Чтобы обеспечить более широкий обзор иммунопатологических последствий, вызванных T. gondii , в дополнительных материалах онлайн представлены репрезентативные микрофотографии иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезов с меньшим увеличением (100 x).

Обнаружение про- и противовоспалительных медиаторов

Кишечник ex vivo биоптатов были разрезаны в продольном направлении, промыты в фосфатно-солевом буфере (PBS; Gibco, Life Technologies, UK) и полосками ~ 1 см ² ткани, а также ex vivo биоптатов, полученных из MLN (3 лимфатические узлы), печень (~ 1 см ³ ), одну почку (разрез в продольном направлении), одно легкое и селезенку (одну треть) переносили на 24-луночные планшеты с плоским дном (Nunc, Германия), содержащие 500 мкл бессывороточная среда RPMI 1640 (Gibco, life technologies, UK) с добавлением пенициллина (100 Ед / мл) и стрептомицина (100 мкг / мл; PAA Laboratories, Германия).Через 18 ч при 37 ° C соответствующие супернатанты культур, а также образцы сыворотки были протестированы на TNF, IFN-γ, MCP-1, IL-6, IL-12p70 и IL-10 с помощью цитометрического анализа на мышах с воспалением (CBA). ; BD Biosciences, Германия) на проточном цитометре BD FACSCanto II (BD Biosciences). Оксид азота измеряли по реакции Грисса, как указано в другом месте (Heimesaat et al., 2006).

Анализ кишечной микробиоты

ДНК

была выделена из образцов просвета подвздошной кишки, как недавно сообщалось (Heimesaat et al., 2006; Bereswill et al., 2014). Вкратце, ДНК количественно определяли с использованием реагента Quant-iT PicoGreen (Invitrogen, UK) и доводили до 1 нг на мкл. Общая эубактериальная нагрузка, а также основные бактериальные группы в кишечной микробиоте мышей, такие как энтеробактерии, энтерококки, лактобациллы, бифидобактерии, видов Bacteroides / Prevotella , Clostridium coccoides, группа и Clostridium leptum, были определены с помощью количественной группы Clostridium leptum 902 -временная полимеразная цепная реакция (qRT-PCR) с праймерами гена 16S рРНК, специфичными для вида, рода или группы (Tib MolBiol, Германия), как указано в другом месте (Heimesaat et al., 2010; Бересвилл и др., 2011; Rausch et al., 2013) (выражается в количестве копий гена 16S рРНК на нг ДНК).

Статистический анализ

Медианы и уровни значимости определяли с помощью однофакторного дисперсионного анализа или теста Краскела-Уоллиса с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений (GraphPad Prism v7, США), как указано. Значения двусторонней вероятности (p) ≤ 0,05 считались значимыми. Опыты воспроизводились трижды.

Результаты

Воспалительные изменения кишечника при пероральном приеме малых доз

T.gondii Инфекция

Для того, чтобы вызвать подострый илеит, традиционно колонизированных мышей перорально вводили низкую дозу (т.е. одну кисту) T. gondii через желудочный зонд и проводили комплексное иммунопатологическое обследование в течение почти 2 месяцев p.i. В течение 10 дней после заражения можно было наблюдать гистопатологические изменения слизистой оболочки подвздошной кишки от легкой до умеренной степени тяжести, начиная от отеков слизистой оболочки, лейкоцитарных инфильтратов слизистой оболочки подвздошной кишки и собственной пластинки, бесклеточного экссудата в просвет тонкой кишки и клеточного выделения ( р <0.001 против наивного; Рисунок 1A и Рисунок S1A). По сравнению с 10-м днем ​​p.i., медианные гистопатологические баллы, количественно оценивающие повреждение слизистой оболочки подвздошной кишки, имели тенденцию быть ниже в более поздние моменты времени, но не достигли статистической значимости из-за высоких стандартных отклонений (н.с.; Рисунок 1A и Рисунок S1A). Мы дополнительно количественно исследовали воспалительные реакции кишечника с применением in situ иммуногистохимии парафиновых срезов кишечника. У инфицированных T. gondii мышей многократное увеличение количества апоптотических эпителиальных клеток подвздошной кишки можно было определить на 10-й и 57-й дни ( p <0.001 и p <0,01, соответственно по сравнению с наивными) с наибольшим количеством биопсий ex vivo , взятых на 10 день p.i. ( p <0,001 по сравнению с 36-м днем ​​и 57-м днем ​​p.i; Рисунок 1B и Рисунок S1B). Параллельно Ki67 + эпителиальные клетки подвздошной кишки, свидетельствующие о пролиферации и регенерации клеток, противодействующие повреждению клеток, вызванному T. gondii , увеличивались до максимума на 10 день p.i. ( p <0,001), затем снизились, но были все еще выше по сравнению с таковыми у наивных контрольных мышей ( p <0.001; Рисунок 1C и Рисунок S1C).

Рисунок 1 . Микроскопические воспалительные последствия в подвздошной кишке с течением времени после пероральной инфекции в малых дозах T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). (A) Гистопатологические изменения количественно оценивали в парафиновых срезах, окрашенных H&E, из биоптатов подвздошной кишки ex vivo , оценивая стандартизированную гистопатологическую систему балльной оценки.Из шести репрезентативных полей с высоким увеличением (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (B) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) и (C) пролиферирующих (Ki67 +) эпителиальных клеток подвздошной кишки, а также (D Т-лимфоцитов (CD3 +) и (E) В-лимфоцитов в слизистой оболочке подвздошной кишки и собственной пластинке оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах тонкой кишки. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Учитывая, что илеит, вызванный T. gondii , сильно зависит от Т-клеток (Munoz et al., 2011), мы количественно оценили CD3 + Т-лимфоциты в слизистой оболочке подвздошной кишки и собственной пластинке. Фактически, количество Т-клеток почти удвоилось за 10 дней p.i., но после этого снова снизилось до наивных значений ( p <0,001; Рисунок 1D и Рисунок S1D). Кроме того, у инфицированных T. gondii мышей также обнаружено повышенное количество В-клеток в слизистой оболочке подвздошной кишки и собственной пластинке на 10-й день.я. ( p <0,01; рисунок 1E и рисунок S1E), но не в более поздние моменты времени.

Недавно мы наблюдали, что T. gondii , индуцированный иммунопатологическими ответами в кишечном тракте, влияет не только на терминальный отдел подвздошной кишки, но также и на толстый кишечник (Escher et al., 2018; Heimesaat et al., 2018a), и, следовательно, расширил наши исследования. воспалительный осмотр толстой кишки. Однако гистопатологические изменения слизистой оболочки слизистой оболочки толстой кишки были довольно незначительными (рисунок S2A) и не достигли статистической значимости из-за высоких стандартных отклонений в соответствующих группах (n.с .; не показано). При количественном определении апоптотических клеток с помощью иммуногистохимии in situ многократное увеличение количества апоптозных эпителиальных клеток толстой кишки можно было оценить только на 10 день p.i. ( p <0,001; рисунок 2A и рисунок S2B), что также верно для Т-лимфоцитов ( p <0,001; рисунок 2C и рисунок S2D) и B-лимфоцитов в слизистой оболочке толстой кишки и собственной пластинке ( p <0,001; рисунок 2C и рисунок S2D). 0,001; Рисунок 2D и Рисунок S2E). Как и в подвздошной кишке, повышенное количество клеток Ki67 + можно было наблюдать в эпителии толстой кишки у T.gondii ( p <0,001; Рисунок 2B и Рисунок S2C),

Рисунок 2 . Микроскопические воспалительные осложнения в толстой кишке с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Из шести репрезентативных полей высокого увеличения (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (A) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) и (B) пролиферирующих (Ki67 +) эпителиальных клеток толстой кишки, а также (C ) Т-лимфоцитов (CD3 +) и (D) В-лимфоцитов слизистой оболочки толстой кишки и собственной пластинки оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах толстой кишки.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Следовательно, апоптотические, пролиферирующие и Т-клеточные, а также В-клеточные ответы как в тонком, так и в толстом кишечнике были наиболее выражены через 10 дней после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii .

Секреция медиатора кишечного воспаления при пероральном приеме малых доз

T. gondii Инфекция

Затем мы оценили секрецию провоспалительного медиатора в биоптатах ex vivo , полученных из различных отделов кишечника (рис. 3). На 10 день p.i. можно было измерить повышенные концентрации оксида азота и IFN-γ в подвздошной кишке ( p <0,001; Рисунки 3A, C), которые впоследствии снизились до наивных уровней. Однако в толстой кишке повышенные концентрации TNF можно было наблюдать в любой момент времени p.я. ( p <0,05-0,001; Рисунок 3E) с максимальными уровнями на 10 день p.i. ( p <0,001; рисунок 3E). Как и в подвздошной кишке, повышенные концентрации IFN-γ были измерены в биопсиях ex vivo толстой кишки исключительно на 10 день p.i. ( p <0,001; фиг. 3F), тогда как повышенные уровни TNF в толстой кишке можно было измерить на 10-й и 57-й дни p.i. ( p <0,001 и p <0,05, соответственно; рисунок 3E).

Рисунок 3 .Секреция провоспалительного медиатора кишечника с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Провоспалительные медиаторы, такие как (A, D, G) оксид азота, (B, E, H) TNF и (C, F, I) IFN-γ, были измерены в ex vivo, взятых биоптатах. из различных отделов кишечника, включая (A – C), подвздошную кишку, (D – F), толстую кишку и (G – I) брыжеечных лимфатических узлов (MLN) в соответствующие моменты времени.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Мы дополнительно исследовали секрецию провоспалительных медиаторов в MLN, дренирующих воспаленный кишечник. Уже на 10-й день после инъекции концентрации TNF и IFN-γ увеличились в MLN ( p <0,001; Рисунки 3H, I), но позже снизились до наивных уровней, что также справедливо для оксида азота ( p <0.05–0.005; Рисунок 3G).

Следовательно, пероральная низкая доза T. gondii инфекции сопровождалась выраженной секрецией провоспалительного медиатора во всем кишечном тракте, особенно на ранней стадии (т.е. в первые 10 дней p.i.).

Изменения кишечной микробиоты при пероральном приеме малых доз

T. gondii Инфекция

Учитывая, что воспалительные процессы в кишечном тракте связаны с выраженными сдвигами в составе микробиоты кишечника (Heimesaat et al., 2006, 2007а, б; Эрридж и др., 2010; Бересвилл и др., 2011; Fiebiger et al., 2016), мы количественно изучили изменения в различных группах и видах кишечных бактерий, применяя методы, не зависящие от культуры 16S рРНК (Рисунки 4A – I). В течение 10 дней количество энтеробактерий и энтерококков увеличилось в образцах просвета, взятых из воспаленной подвздошной кишки ( p <0,001; Рисунки 4B, C), но затем снизилось ( p <0,05–0,001; Рисунки 4B, C), тогда как облигатные анаэробные грамотрицательные виды, такие как Bacteroides / Prevotella , были немного выше в любой момент времени p.я. по сравнению с наивными мышами ( p <0,05; фиг. 4F). Напротив, количество лактобактерий было ниже в образцах подвздошной кишки, полученных от инфицированных T. gondii мышей ( p <0,01–0,001; рис. 4D), что также верно для бифидобактерий на 36-й и 57-й дни. ( p <0,05–0,01; рисунок 4E). В отличие от энтеробактерий и энтерококков, облигатные анаэробные Clostridium coccoides и Mouse Intestinal Bacteroides снизились до самых низких уровней до 10 дня.я. ( p <0,05–0,005; рисунки 4G – I), но позже увеличился ( p <0,05–0,001; рисунки 4G, I). Для Clostridium leptum наблюдается тенденция к снижению количества генов на 10-й день p.i. по сравнению с наивными условиями (н.с. из-за высоких стандартных отклонений; рис. 4H), тогда как бактериальная нагрузка была выше на 36-й и 37-й день по сравнению с 10-м днем ​​p.i. ( p <0,001 и p <0,01, соответственно; рисунок 4H).

Рисунок 4 .Состав микробиоты подвздошной кишки и паразитарные нагрузки с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). (A) Общая нагрузка эубактерий, а также основные группы кишечных бактерий ( B – I , как указано) и (J) ДНК T. gondii были количественно определены в образцах подвздошной кишки молекулярными методами, не зависящими от культуры. и выражается как количество генов на нг ДНК.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Следует отметить, что увеличение ДНК T. gondii можно было обнаружить в биопсиях тонкого кишечника на 10 день p.i., но не позже ( p <0,001; Рисунок 4J).

Следовательно, т.gondii индуцированные иммунопатологические последствия, наблюдаемые в подвздошной кишке, сопровождались выраженными сдвигами в составе микробиоты просвета кишечника в дистальных отделах тонкой кишки.

Внекишечные воспалительные изменения при пероральном приеме малых доз

T. gondii Инфекция

Затем мы исследовали потенциал T. gondii , вызывающий воспалительные изменения во внекишечных отделах с течением времени. T. gondii. инфицированных мышей показали повышенное количество клеток caspase3 + в печени исключительно на 10 день p.я. ( p <0,001; Рисунок 5A и Рисунок S4A). Кроме того, количество печеночных клеток F4 / 80 + увеличивалось уже на 10 день p.i. ( p <0,001), но снизился до наивных цифр до 57 дня p.i. ( p <0,001; Рисунок 5B и Рисунок S3B). В любой момент времени p.i. у мышей обнаруживалось повышенное количество как Т-, так и В-лимфоцитов в печени ( p <0,001; Фигуры 5C, D и Фигуры S3C, D). Кроме того, индуцированные T. gondii ответы воспалительных клеток печени сопровождались повышенной секрецией провоспалительных медиаторов, измеренной на 10-й день.я. ( p <0,001 по сравнению с наивными; рисунки 6A – C). На 36 день p.i. концентрации печеночного противовоспалительного IL-10 были ниже по сравнению с таковыми, полученными на 10 день p.i. ( p <0,01; рисунок 6D).

Рисунок 5 . Микроскопические воспалительные осложнения в печени с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (стр.я.; замкнутые круги). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Из шести репрезентативных полей с высоким увеличением (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (A) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) и (B) пролиферирующих (Ki67 +) клеток, а также (C) Т-лимфоциты (CD3 +) и (D) В-лимфоцитов оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах печени. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Рисунок 6 . Секреция медиатора воспаления в печени с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Концентрации (A) оксида азота, (B) TNF, (C) IFN-γ и (D) IL-10 были измерены в ex vivo биоптатах, взятых из печени в соответствующие моменты времени.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Усиление воспалительных реакций при инфицировании низкой дозой T. gondii также может наблюдаться в почках. Фактически, на 10-й день после инфицирования T. gondii у мышей обнаруживалось многократное увеличение количества апоптотических клеток в почках, но не позднее (Рисунок 7A и Рисунок S4A), тогда как количество почечных Т-клеток было повышено в любой момент времени p .я. ( p <0,05–0,001), но с более низкими показателями на 57-й день по сравнению с 10-м днем ​​p.i. ( p <0,001; рисунок 7B и рисунок S4B). Вызванное патогеном увеличение количества В-клеток в почках можно было наблюдать довольно поздно в ходе инфекции (т.е. на 36-й и 57-й дни; p <0,001; Рисунок 7C и Рисунок S4C). При оценке секреции провоспалительного медиатора в почечной биопсии ex vivo оксид азота, TNF и IFN-γ увеличивались уже на 10-й день p.i. ( стр. <0.001; Рисунки 8A – C). Напротив, концентрации ИЛ-10 были ниже на 10-й и 36-й дни. по сравнению с наивными мышами ( p <0,001; фигура 8D).

Рисунок 7 . Микроскопические воспалительные осложнения в почках с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки).Из шести репрезентативных полей с высоким увеличением (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (A) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) клеток, (B) Т-лимфоцитов (CD3 +) и (C) B лимфоциты оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах почек. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Рисунок 8 . Секреция медиатора воспаления почками с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Концентрации (A) оксида азота, (B) TNF, (C) IFN-γ и (D) IL-10 были измерены в ex vivo биоптатах, взятых из почек в соответствующие моменты времени. .Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Мы расширили наше исследование воспалительных процессов на легкие. Апоптоз легочных клеток резко увеличивался до 10 дня p.i. ( p <0,001), но позже снизился до наивных уровней ( p <0.001; Рисунок 9A и Рисунок S5A). У мышей, инфицированных низкими дозами T. gondii , также наблюдалось повышенное количество клеток F4 / 80 + в легких ( p <0,001) с максимальным количеством на 36 день p.i. (Рисунок 9B и Рисунок S5B). Кроме того, легочные Т-лимфоциты были повышены в любой момент времени после инфицирования T. gondii ( p <0,001; Рисунок 9C и Рисунок S5C), тогда как T. gondii индуцированное увеличение B-лимфоцитов можно было оценить позже. стадии инфекции (т.е., дни 36 и 57 п.и .; p <0,001) с наибольшим количеством в конце опроса; ( p <0,001; рисунок 9D и рисунок S5D).

Рисунок 9 . Микроскопические воспалительные последствия в легких с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки).Из шести репрезентативных полей с высоким увеличением (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (A) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) клеток, (B) макрофагов и моноцитов (F4 / 80 +), (C) Т-лимфоцитов (CD3 +) и (D) В-лимфоцитов оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах легких. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Интересно, что повышенная секреция провоспалительных цитокинов, таких как TNF и IFN-γ ( p <0,001), а также концентрации противовоспалительного IL-10 ( p <0,05) может быть определена исключительно в легких, взятых в самая ранняя временная точка пи (Рисунок 10).

Рисунок 10 . Секреция легочного медиатора воспаления с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii .Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Концентрации (A) TNF, (B) IFN-γ и (C) IL-10 измеряли в ex vivo биоптатах, взятых из легких в соответствующие моменты времени. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Примечательно, что явные вызванные T. gondii воспалительные изменения также можно было оценить в сердце, о чем свидетельствует увеличение количества апоптотических клеток в дни, а также Т-лимфоцитов в сердечной мышце инфицированных мышей ( p <0,01–0,001 ; Рисунки S6A, B, S7A, B), тогда как наибольшее количество апоптотических клеток можно было подсчитать в конце исследования ( p <0,05 против d10 pi; Рисунки S6A, S7A).Кроме того, количество сердечных В-клеток было выше на 36-й и 57-й дни. по сравнению с более ранними временными точками ( p <0,05–0,01; рисунки S6C, S7C).

Следовательно, выраженные воспалительные реакции после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii не ограничивались кишечным трактом, но также могли наблюдаться во внекишечных отделах.

Системные воспалительные реакции при пероральной низкой дозе

T. gondii Инфекция

Затем мы оценили т.gondii индуцировал иммунопатологические ответы в системных компартментах. Принимая во внимание, что повышенные провоспалительные цитокины, такие как IFN-γ и IL-12p70, можно было измерить в биоптатах ex vivo селезенки на 10 день p.i. только ( p <0,001; Фигуры 11A, B), уровни противовоспалительного IL-10 были лишены в селезенке в любой временной точке p.i. ( p <0,001; фигура 11C). Поразительно, что повышенные концентрации TNF, IFN-γ, MCP-1 и IL-6 были получены в образцах сыворотки, взятых у T.gondii инфицированных мышей на 10 день p.i. ( p, <0,001), но позже снизился до исходного уровня ( p <0,001; рисунки 12A – D). В случае IL-10 незначительное повышение концентрации в сыворотке можно было наблюдать исключительно на 36 день p.i. ( p <0,05; рисунок 12E).

Рисунок 11 . Секреция медиатора воспаления в селезенке с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T.gondii в день 0 и обследованы на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Концентрации (A) IFN-γ, (B) IL-12p70 и (C) IL-10 измеряли в биоптатах ex vivo , взятых из селезенки в соответствующие моменты времени. Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках).Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Рисунок 12 . Системная секреция медиатора воспаления с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). (A) TNF, (B) IFN-γ, (C) MCP-1, (D) IL-6 и (E) IL-10. соответствующие моменты времени.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Следовательно, воспалительные реакции после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii можно было оценить даже в системных компартментах, которые были наиболее выражены в течение первых 10 дней p.i.

Обсуждение

Пероральный высокодозный Т.gondii , как было доказано, хорошо подходит для исследования основного молекулярного механизма взаимодействий патоген-хозяин и последующего индуцированного острого воспаления тонкой кишки (McLeod et al., 1989a, b; Liesenfeld et al., 1996, 1999; Liesenfeld, 2002; Vossenkamper et al., 2004; Heimesaat et al., 2006; Munoz et al., 2009, 2011, 2015). В этом контексте, однако, необходимо принять во внимание, что тяжесть илеита, вызванного T. gondii , не соответствует линейной причинно-следственной связи с количеством паразитарных цист, которыми заражены мыши.Фактически, это скорее критический порог количества кист, который необходимо достичь, чтобы вызвать полномасштабный воспалительный сценарий, в дальнейшем в зависимости от паразитарного штамма, генетического фона и пола мыши-хозяина (Liesenfeld et al., 1999; Munoz et al., 2011; Heimesaat et al., 2018a). Однако, учитывая летальный исход в течение 7–10 дней, информация о отдаленных последствиях воспаления кишечника, вызванного штаммом T. gondii ME49, является скудной.

Мы установили гораздо менее острый T.gondii индуцировал модель илеита путем уменьшения количества перорально применяемой дозы паразитарной инфекции с> 50 цист до только одной цисты на мышь-реципиент (Dunay et al., 2008; Heimesaat et al., 2018a). Можно представить себе, что случайное увеличение количества паразитарного инокулята может привести к нежелательно более тяжелому илеиту с летальным исходом в течение <2 недель. Помимо критически низкой дозы инфекции, различные характеристики хозяина, такие как возраст и пол инфицированных мышей, могут влиять на тяжесть индуцированной иммунопатологии (Liesenfeld et al., 1999; Дунай и др., 2008; Муньос и др., 2011; Heimesaat et al., 2018a). Следовательно, воспроизводимость и надежность модели заражения малой дозой T. gondii людей в значительной степени зависит от строго стандартизированных условий и опыта исследователей, занимающихся обработкой (Heimesaat et al., 2018a). Тем не менее, имея под рукой модель подострого илеита, мы теперь можем исследовать взаимодействия в рамках отношений треугольника («ménage-à-trois») паразитарного патогена, иммунитета хозяина и микробиоты комменсального кишечника во время воспаления кишечника в течение 2 месяцев. (как в настоящем исследовании) или даже дольше.В наших недавних исследованиях инфекции T. gondii с низкой дозой мышей умерщвляли на 9 день p.i. (Escher et al., 2018; Heimesaat et al., 2018a).

В нашем реальном иммунопатологическом исследовании, продолжавшемся более 8 недель, у мышей, инфицированных T. gondii перорально в низких дозах, в течение 10 дней развился подострый илеит, который характеризовался нелетальным исходом, довольно легкими симптомами и гистопатологическими изменениями от легких до умеренных. слизистой оболочки подвздошной кишки, но никакого некроза кишечника.Кроме того, апоптоз эпителиального эпителия подвздошной кишки сопровождался сопутствующим увеличением количества пролиферирующих / регенерирующих эпителиальных клеток в терминальном отделе подвздошной кишки, противодействующих воспалительному повреждению. Примечательно, что воспалительные изменения, вызванные T. gondii , не повлияли исключительно на терминальный отдел подвздошной кишки, который считается местом предрасположенности после перорального приема высокой дозы T. gondii инфекции (Liesenfeld et al., 1996; Munoz et al., 2011), но также и в толстом кишечном тракте, учитывая, что количество апоптотических эпителиальных клеток, а также Т- и В-лимфоцитов в слизистой оболочке и собственной пластинке обеих, подвздошной и толстой кишки было самым высоким на 10-й день после инфицирования, но впоследствии снизилось.Эти воспалительные клеточные реакции сопровождались усиленной секрецией провоспалительного медиатора в подвздошной, толстой и мезентериальных лимфатических узлах, что также было наиболее выражено на ранней стадии инфекции. В подтверждение этого в наших предыдущих исследованиях острого илеита (в отношении кишечной микробиоты) «гуманизированных» мышей мы могли продемонстрировать сопутствующее поражение толстой кишки при пероральном приеме инфекции T. gondii в высоких дозах (von Klitzing et al., 2017a, б). Кроме того, Судзуки и его коллеги сообщили о воспалительных изменениях в толстом кишечнике после перорального инфицирования мышей IL-10 ^{— / —} 20 цистами штамма ME49 (Suzuki et al., 2000).

Примечательно, что как пероральная высокая, так и низкая доза T. gondii инфекция привела к провоспалительным последствиям, которые не ограничивались кишечным трактом, но также могли наблюдаться во внекишечных и даже системных компартментах, как показано в нашем исследовании. предыдущие отчеты (von Klitzing et al., 2017a, b; Heimesaat et al., 2018a, b) и фактическое исследование. В целом, T. gondii индуцированные и управляемые Т-клетками провоспалительные иммунные ответы наблюдались во внекишечных органах, таких как печень, почки, легкие и сердце, в течение всего периода наблюдения, но в целом были наиболее выраженными на ранней стадии ( я.е., примерно в день 10 p.i.). В зависимости от соответствующей паразитарной инфекции (т. Е. Количества и деформации цист, перорального или внутрибрюшинного пути) мышей с определенным генетическим фоном в литературе доступна различная информация о внекишечных паразитарных инфекциях. Например, в одном исследовании, посвященном исключительно оценке распространения паразитов после перорального инфицирования 20 цистами авирулентного штамма T. gondii C , паразитарные нагрузки в легких быстро увеличивались до 7-10 дней и исчезали до 50 дней.я. (Деруин и Гарин, 1991). По сравнению с обнаружением легочных паразитов, паразитемия задерживалась во время острой фазы инфекции (то есть первые 7 дней p.i.), тогда как паразитемия низкого уровня, как было показано, временно возникала позже (Derouin and Garin, 1991). В другом исследовании инфекции T. gondii можно было обнаружить в печени и легких мышей уже через 7-10 дней после перорального заражения 20 цистами авирулентного штамма C (Sumyuen et al., 1995). Дубей сообщил о паразитемии в течение 24 часов после пероральной инфекции и паразитарной инвазии во внекишечные органы, включая печень, легкие, почки, скелетные и сердечные мышцы, в период с 11 по 15 день.я. (Дубей, 1997). Однако в этих исследованиях нет никакой дополнительной информации об иммунопатологических последствиях в инфицированных компартментах. После заражения мышей C57BL / 6 10 цистами штамма ME49 внутрибрюшинным путем Лизенфельд и его коллеги сообщили о довольно умеренной инфильтрации легких воспалительными мононуклеарными клетками в течение 7 дней после инфицирования, в то время как воспалительные очаги не могли быть оценены в других органах, таких как сердце или толстый кишечник (Liesenfeld et al., 1996).

В нашем настоящем исследовании инфекции T. gondii с низкой дозой паразитарная ДНК была обнаружена только в подвздошной кишке ex vivo биопсий, взятых на 10 день пи, но была ниже предела обнаружения в любом другом кишечном или внекишечном ex vivo В течение периода наблюдения было взято биопсий, что дополнительно подчеркивает, что наблюдаемые воспалительные изменения скорее связаны с иммунологическими ответами на первоначальное заражение T. gondii только с одной единственной кистой.Необходимо принять во внимание, что (паразитарный) патоген не обязательно должен постоянно находиться в инфицированном компартменте тела, чтобы вызвать воспалительные последствия. Это скорее первоначальный удар, нанесенный патогеном хозяину, впоследствии склоняющий чашу весов в сторону иммунопатологии (Alutis et al., 2015; Heimesaat et al., 2016a, b, c; Grunau et al., 2017).

Хорошо известно, что отлаженные взаимодействия между сложной кишечной бактериальной экосистемой и хозяином имеют решающее значение для иммунного гомеостаза, физиологии клеток и устойчивости к болезням (Ekmekciu et al., 2017а). Следовательно, нарушения в организованном составе комменсальной микробиоты кишечника связаны с развитием и исходом иммунопатологических заболеваний, включая воспаление желудочно-кишечного тракта (Heimesaat et al., 2006; Erridge et al., 2010; Bereswill et al., 2011; Fiebiger et al., 2016; Ekmekciu et al., 2017a). Наше независимое от культуры исследование бактериальных изменений кишечника во время инфицирования низкой дозой T. gondii показало, что до 10 дня p.i. (когда тяжесть индуцированного илеита была максимальной) грамотрицательные бактериальные комменсалы, такие как энтеробактерии, включая E.coli увеличилось в воспаленном просвете подвздошной кишки, тогда как, наоборот, количество грамположительных лактобацилл и клостридий, а также Mouse Intestinal Bacteroides уменьшилось. Эти наблюдения хорошо согласуются с результатами наших исследований инфекции T. gondii , вызванной смертельной высокой дозой , учитывая, что развитие илеита сопровождалось резкими сдвигами в составе микробиоты подвздошной кишки в сторону чрезмерного роста энтеробактериальными видами, тогда как разнообразие комменсальных бактерий уменьшилось и в частности, лактобациллы и клостридии практически не обнаруживались (Heimesaat et al., 2006, 2007а; Erridge et al., 2010). T. gondii вызванный илеит дополнительно усугублялся Toll-подобным рецептором (TLR) -4-зависимой передачей сигналов липополисахарида, происходящей из клеточных стенок разрастающихся грамотрицательных видов (Heimesaat et al., 2007a; Erridge et al., 2010 ). Во время хронической фазы инфекции T. gondii , вызванной низкой дозой (т.е. на 36-й и 57-й дни), у мышей было меньше бифидобактерий, но также лактобактерий в тонком кишечнике по сравнению с неинфицированными контрольными животными.В частности, бифидобактерии и лактобациллы считаются «полезными для здоровья» комменсалами с иммуномодулирующими свойствами и разделяющими важные функции во время иммунного гомеостаза (Bereswill et al., 2017; Ekmekciu et al., 2017b, c; Heimesaat et al., 2017). Было показано, что дисбактериоз с пониженной кишечной бифидобактериальной нагрузкой связан, например, с целиакией, синдромом раздраженного кишечника, воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК) и атопическими заболеваниями (Tojo et al., 2014). Кроме того, острый илеит был более выражен при высокой дозе T.gondii инфицировали обычных мышей, у которых был дефицит гена либо по TLR-9, либо по нуклеотид-связывающему домену олигомеризации (NOD) 2, и у обоих не было кишечных бифидобактериальных комменсалов (Bereswill et al., 2014; Heimesaat et al., 2014).

Мышиная модель инфекции T. gondii с низкой дозой чаще всего использовалась для исследования паразитарного воспаления центральной нервной системы, учитывая, что при внутрибрюшинном заражении <10 T. gondii развиваются цисты у мышей, чувствительных к штамму ME49. хроническое церебральное воспаление (Dunay et al., 2010; Бисвас и др., 2015; Mohle et al., 2016; Lang et al., 2018; Dusedau et al., 2019). Однако для исследования подострых / хронических кишечных и внекишечных (помимо неврологических) иммунопатологических изменений модель инфекции с низкими дозами до сих пор применялась только в единичных исследованиях (Dunay et al., 2008; Escher et al., 2018; Heimesaat et al. др., 2018а).

В заключение, здесь представлено долгосрочное кинетическое исследование иммунопатологических последствий в кишечном, внекишечном и системном отделах после перорального приема малых доз T.gondii является ценным краеугольным камнем для лучшего понимания сложных взаимодействий в рамках треугольной взаимосвязи (паразитарных) патогенов, иммунитета хозяина и комменсальной микробиоты кишечника во время подострого и хронического воспаления кишечника. Кроме того, модель инфекции T. gondii с низкой дозой может быть применена в качестве ценной модели воспаления кишечника в будущих доклинических исследованиях, чтобы проверить возможные варианты лечения воспалительных состояний кишечника у людей (Bereswill et al., 2019).

Заявление об этике

После одобрения местными властями экспериментов на животных (für Gesundheit und Soziales, LaGeSo, Berlin, регистрационные номера G244 / 98) эксперименты на мышах были выполнены в соответствии с Европейскими рекомендациями по благополучию животных (2010/63 / EU). Клиническое состояние мышей оценивали не реже одного раза в день.

Авторские взносы

MH разработал и провел эксперименты, проанализировал данные, написал статьи. ID критически обсудил экспериментальный план и результаты, отредактировал статью.SB давал советы по дизайну экспериментов, критически обсуждал результаты, редактировал статью.

Финансирование

Эта работа была поддержана Федеральным министерством образования и исследований Германии (BMBF) в рамках консорциума по исследованию зоонозов PAC-Campylobacter to MH и SB (IP7 / 01KI1725D). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим Александру Биттрофф-Лебен, Инес Пушендорф, Ульрику Фибигер, Анн Грунау, Ульрику Эшер, Гернота Райфенбергера и персонал исследовательского центра на животных Шарите — Университет медицины Берлина за отличную техническую помощь и разведение животных. Мы также благодарим доктора Аню А. Кюль (Отделение медицины I гастроэнтерологии, инфекционных заболеваний и ревматологии / Исследовательский центр иммунологии (RCIS), Charité — Universitätsmedizin Berlin) за репрезентативные микрофотографии иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезов.Мы признательны за поддержку Немецкому исследовательскому фонду (DFG) и Фонду публикаций открытого доступа Charité — Universitätsmedizin Berlin.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcimb.2019.00098/full#supplementary-material

Рисунок S1 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и отдельные популяции иммунных клеток в подвздошной кишке с течением времени после перорального приема низкой дозы T.gondii инфекция. Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии, сделанные из подвздошной кишки, иллюстрируют (A) гистопатологических изменений (окрашивание H&E) и (B) апоптотических (каспаза3 +, Casp3 +) клеток, (C) пролиферирующих (Ki67 +) клеток, (D) T-лимфоцитов. (CD3 +) и (E) B лимфоцитов (B220 +) в парафиновых срезах, окрашенных иммуногистохимически, в соответствующие моменты времени (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Рисунок S2 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и отдельные популяции иммунных клеток в толстой кишке с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии, сделанные из толстой кишки, показывают (A) гистопатологических изменений (окрашивание H&E) и (B) апоптотических (каспаза3 +, Casp3 +) клеток, (C) пролиферирующих (Ki67 +) клеток, (D) Т-лимфоцитов. (CD3 +) и (E) B лимфоцитов (B220 +) в парафиновых срезах, окрашенных иммуногистохимически, в соответствующие моменты времени (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Рисунок S3 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и отдельные популяции иммунных клеток в печени с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии, сделанные из печени, иллюстрируют (A) апоптотических (caspase3 +, Casp3 +) клеток, (B) макрофагов / моноцитов (F4 / 80 +), (C) T-лимфоцитов (CD3 +) и (D ) B-лимфоцитов (B220 +) в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах в соответствующие моменты времени (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Рисунок S4 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и различные популяции иммунных клеток в почках с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии, сделанные из почек, иллюстрируют (A) апоптотических (caspase3 +, Casp3 +) клеток, (B) T-лимфоцитов (CD3 +) и (C) B-лимфоцитов (B220 +) в парафиновых срезах, окрашенных иммуногистохимически. точек (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Рисунок S5 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и отдельные популяции иммунных клеток в легких с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии легких иллюстрируют (A) апоптотических (caspase3 +, Casp3 +) клеток, (B) макрофагов / моноцитов (F4 / 80 +), (C) T-лимфоцитов (CD3 +) и (D). ) B-лимфоцитов (B220 +) в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах в соответствующие моменты времени (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Рисунок S6 . Микроскопические воспалительные последствия в сердечной мышце с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii . Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на дни (d) 10, 36 и 57 после инфицирования (p.i; темные кружки). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем (белые кружки). Из шести репрезентативных полей с высоким увеличением (HPF, увеличение 400x) на животное среднее количество (A) апоптотических (casapse3 +, Casp3 +) клеток, (B) Т-лимфоцитов (CD3 +) и (C) B лимфоциты оценивали в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах сердца.Указаны медианы (черные столбцы), уровни значимости (значения p ), определенные односторонним тестом ANOVA с последующей пост-коррекцией Тьюки для множественных сравнений, и количество проанализированных мышей (в скобках). Данные были объединены из четырех независимых экспериментов.

Рисунок S7 . Репрезентативные микрофотографии, иллюстрирующие воспалительные изменения и отдельные популяции иммунных клеток в сердце с течением времени после перорального инфицирования низкой дозой T. gondii .Мышей перорально инфицировали одной цистой T. gondii в день 0 и обследовали на 10, 36 и 57 дни после инфицирования (p.i.). Наивные (N) мыши служили неинфицированным контролем. Репрезентативные микрофотографии, сделанные из сердца, иллюстрируют (A) апоптотических (caspase3 +, Casp3 +) клеток, (B) T-лимфоцитов (CD3 +) и (C) B-лимфоцитов (B220 +) в иммуногистохимически окрашенных парафиновых срезах. точек (100-кратное увеличение, масштабная линейка 100 мкм).

Сокращения

CBA, набор цитометрических шариков; H&E, гематоксилин и эозин; ВЗК, воспалительное заболевание кишечника; ИФН, интерферон; ИЛ, интерлейкин; MLN, мезентериальные лимфатические узлы; NOD, нуклеотид-домен олигомеризации; PBS, фосфатно-солевой буфер; п.и. — постинфекция; SPF, свободный от специфических патогенов; TLR, толл-подобный рецептор; TNF, фактор некроза опухоли; WT, дикий тип.

Ссылки

Алутис, М. Э., Грундманн, У., Фишер, А., Хаген, У., Куль, А. А., Гобель, У.B., et al. (2015). Роль желатиназ в инфекции Campylobacter jejuni мышей-гнотобиотиков. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 5, 256–267. DOI: 10.1556 / 1886.2015.00033

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бересвилл, С., Экмекчиу, И., Эшер, У., Фибигер, У., Стингл, К., Хеймесаат, М. М. (2017). Lactobacillus johnsonii улучшает кишечные, внекишечные и системные провоспалительные иммунные реакции после инфицирования мышиным вирусом Campylobacter jejuni . Sci. Отчет 7: 2138. DOI: 10.1038 / s41598-017-02436-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бересвилл С., Эшер У., Грунау А., Кюль А. А., Дунай И. Р., Тамас А. и др. (2019). Полипептид, активирующий аденилатциклазу гипофиза — новый вариант лечения подострого илеита у мышей с микробиотой кишечника человека. Фронт. Иммунол. 10. doi: 10.3389 / fimmu.2019.00554

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бересвилл, С., Фишер, А., Пликерт, Р., Хааг, Л. М., Отто, Б., Куль, А. А. и др. (2011). Новые модели инфицирования мышей обеспечивают глубокое понимание «menage a trois» Campylobacter jejuni , микробиоты и врожденного иммунитета хозяина. PLoS ONE 6: e20953. DOI: 10.1371 / аннотация / 5247af81-4595-44b7-9c3f-2e45ad85abfa

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бересвилл, С., Кул, А.А., Алутис, М., Фишер, А., Мохле, Л., Штрук, Д. и др. (2014).Влияние толл-подобного рецептора-9 на состав кишечной микробиоты и внекишечные последствия у экспериментального Toxoplasma gondii , вызванного илеитом. Gut Pathog. 6:19. DOI: 10.1186 / 1757-4749-6-19

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бисвас, А., Брудер, Д., Вольф, С. А., Джерон, А., Мак, М., Хеймсаат, М. М. и др. (2015). Моноциты Ly6C (высокие) контролируют церебральный токсоплазмоз. J. Immunol. 194, 3223–3235. DOI: 10.4049 / jimmunol.1402037

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Derouin, F., и Garin, Y.J. (1991). Toxoplasma gondii : кинетика крови и тканей во время острых и хронических инфекций у мышей. Exp. Паразитол. 73, 460–468. DOI: 10.1016 / 0014-4894 (91)-D

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дубей, Дж. П. (1997). Мышиный токсоплазмоз, индуцированный брадизоитом: стадия конверсии, патогенез и образование тканевых кист у мышей, получавших брадизоиты различных штаммов Toxoplasma gondii . J. Eukaryot. Microbiol. 44, 592–602. DOI: 10.1111 / j.1550-7408.1997.tb05965.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дунай И. Р., Даматта Р. А., Фукс Б., Прести Р., Греко С., Колонна М. и др. (2008). Воспалительные моноциты Gr1 (+) необходимы для устойчивости слизистой оболочки к патогену Toxoplasma gondii . Иммунитет 29, 306–317. DOI: 10.1016 / j.immuni.2008.05.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дунай, И.Р., Фукс, А., Сибли, Л. Д. (2010). Воспалительные моноциты, но не нейтрофилы, необходимы для борьбы с инфекцией Toxoplasma gondii у мышей. Заражение. Иммун. 78, 1564–1570. DOI: 10.1128 / IAI.00472-09

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Dusedau, H.P., Kleveman, J., Figueiredo, C.A., Biswas, A., Steffen, J., Kliche, S., et al. (2019). p75 (NTR) регулирует функцию мононуклеарных клеток головного мозга и структуру нейронов при нейровоспалении, вызванном токсоплазменной инфекцией. Glia 67, 193–211. DOI: 10.1002 / glia.23553

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ekmekciu, I., von Klitzing, E., Fiebiger, U., Escher, U., Neumann, C., Bacher, P., et al. (2017a). Иммунные ответы на лечение антибиотиками широкого спектра действия и трансплантацию фекальной микробиоты у мышей. Фронт. Иммунол. 8: 397. DOI: 10.3389 / fimmu.2017.00397

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Экмекчу, И., фон Клитцинг, Э., Fiebiger, U., Neumann, C., Bacher, P., Scheffold, A., et al. (2017b). Пробиотическое соединение VSL # 3 модулирует слизистый, периферический и системный иммунитет после лечения мышей антибиотиками широкого спектра действия. Фронт. Клетка. Заразить. Microbiol. 7: 167. DOI: 10.3389 / fcimb.2017.00167

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ekmekciu, I., von Klitzing, E., Neumann, C., Bacher, P., Scheffold, A., Bereswill, S., et al. (2017c). Трансплантация фекальной микробиоты, штаммы комменсала Escherichia coli и lactobacillus johnsonii по-разному восстанавливают популяции кишечных и системных адаптивных иммунных клеток после лечения антибиотиками широкого спектра действия. Фронт. Microbiol. 8: 2430. DOI: 10.3389 / fmicb.2017.02430

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эрридж К., Дункан С. Х., Бересвилл С. и Хеймсаат М. М. (2010). Вызвание колита и илеита у мышей связано с заметным увеличением кишечных концентраций стимуляторов TLR 2, 4 и 5. PLoS ONE 5: e9125. DOI: 10.1371 / journal.pone.0009125

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эшер, У., Гилади, Э., Дунай, И. Р., Бересвилл, С., Гозес, И., и Хеймсаат, М. М. (2018). Противовоспалительные эффекты октапептида NAP у мышей, ассоциированных с микробиотой человека, страдающих подострым илеитом. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 8, 34–40. DOI: 10.1556 / 1886.2018.00006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фибигер, У., Бересвилл, С., Хеймесаат, М. М. (2016). Анализ взаимодействия между кишечной микробиотой и иммунитетом хозяина в отношении здоровья и болезни: уроки, извлеченные из моделей без микробов и гнотобиотических животных. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 6, 253–271. DOI: 10.1556 / 1886.2016.00036

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Грунау А., Эшер У., Куль А. А., Бересвилл С. и Хеймсаат М. М. (2017). Толл-подобный рецептор-4 по-разному опосредует кишечные и внекишечные иммунные ответы при ассоциации Pseudomonas aeruginosa мышей IL10 (- / -) с множественной лекарственной устойчивостью с хроническим колитом. Gut Pathog. 9:61. DOI: 10.1186 / s13099-017-0211-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M.М., Алутис, М. Е., Грундманн, У., Фишер, А., Гобель, У. Б., и Бересвилл, С. (2016c). Роль IL-23, IL-22 и IL-18 в инфекции Campylobacter jejuni обычных мышей. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 6, 124–136. DOI: 10.1556 / 1886.2016.00008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Bereswill, S., Fischer, A., Fuchs, D., Struck, D., Niebergall, J., et al. (2006). Грамотрицательные бактерии усугубляют иммунопатологию Th2-типа тонкого кишечника мышей после орального заражения Toxoplasma gondii . J. Immunol. 177, 8785–8795. DOI: 10.4049 / jimmunol.177.12.8785

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Dunay, I. R., Alutis, M., Fischer, A., Mohle, L., Gobel, U. B., et al. (2014). Домен-2 нуклеотидной олигомеризации влияет на состав комменсальной микробиоты кишечника и внутримозговую иммунопатологию при остром индуцированном Toxoplasma gondii илеите мыши. PLoS ONE 9: e105120. DOI: 10.1371 / journal.pone.0105120

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M.М., Эшер У., Грунау А., Фибигер У. и Бересвилл С. (2018a). Пероральная низкая доза Toxoplasma gondii инфекция мышей, ассоциированных с микробиотой человека — модель подострого илеита для выяснения взаимодействия патоген-хозяин. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 8, 53–61. DOI: 10.1556 / 1886.2018.00005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Fischer, A., Jahn, H. K., Niebergall, J., Freudenberg, M., Blaut, M., et al. (2007a). Обострение илеита у мышей из-за toll-подобного рецептора 4, опосредованного восприятием липополисахарида от комменсала Escherichia coli . Кишечник 56, 941–948. DOI: 10.1136 / gut.2006.104497

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Fischer, A., Siegmund, B., Kupz, A., Niebergall, J., Fuchs, D., et al. (2007b). Сдвиг в сторону провоспалительных кишечных бактерий усугубляет острый колит у мышей через toll-подобные рецепторы 2 и 4. PLoS ONE 2: e662. DOI: 10.1371 / journal.pone.0000662

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M.М., Гилади, Э., Кул, А. А., Бересвилл, С., Гозес, И. (2018b). Октапетид NAP облегчает кишечные и внекишечные противовоспалительные последствия острого экспериментального колита. Пептиды 101: 1–9. DOI: 10.1016 / j.peptides.2017.12.023

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Grundmann, U., Alutis, M. E., Fischer, A., Gobel, U. B., and Bereswill, S. (2016a). Ось IL-23 / IL-22 / IL-18 при инфицировании мышей Campylobacter jejuni . Gut Pathog. 8:21. DOI: 10.1186 / s13099-016-0106-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Grundmann, U., Alutis, M. E., Fischer, A., Gobel, U. B., and Bereswill, S. (2016b). Экспрессия в толстой кишке генов, кодирующих медиаторы воспаления и желатиназы, во время инфицирования Campylobacter Jejuni обычных мышей-младенцев. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 6, 137–146. DOI: 10.1556 / 1886.2016.00009

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M.M., Nogai, A., Bereswill, S., Plickert, R., Fischer, A., Loddenkemper, C., et al. (2010). MyD88 / TLR9 опосредует иммунопатологию и динамику кишечной микробиоты в новой мышиной модели кишечной реакции трансплантат против хозяина. Кишечник 59, 1079–1087. DOI: 10.1136 / gut.2009.197434

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Heimesaat, M. M., Reifenberger, G., Vicena, V., Illes, A., Horvath, G., Tamas, A., et al. (2017). Изменения кишечной микробиоты у мышей, лишенных полипептида, активирующего аденилатциклазу гипофиза (PACAP), — бифидобактерии. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 7, 187–199. DOI: 10.1556 / 1886.2017.00021

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ланг Д., Шотт Б. Х., ван Хэм М., Мортон Л., Куликовская Л., Эррера-Молина Р. и др. (2018). Хроническая токсоплазменная инфекция связана с отчетливыми изменениями в составе синаптических белков. J. Нейровоспаление 15, 216. DOI: 10.1186 / s12974-018-1242-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лизенфельд, О.(2002). Инфекция полости рта мышей C57BL / 6 с помощью Toxoplasma gondii : новая модель воспалительного заболевания кишечника ?. J. Infect. Дис. 185 (Дополнение 1), S96–101. DOI: 10.1086 / 338006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лизенфельд, О., Канг, Х., Парк, Д., Нгуен, Т.А., Паркхе, К.В., Ватанабе, Х., и др. (1999). TNF-альфа, оксид азота и IFN-гамма имеют решающее значение для развития некроза тонкого кишечника и ранней смертности у генетически восприимчивых мышей, инфицированных перорально с помощью Toxoplasma gondii . Parasite Immunol. 21, 365–376. DOI: 10.1046 / j.1365-3024.1999.00237.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лизенфельд, О., Косек, Дж., Ремингтон, Дж. С., и Сузуки, Ю. (1996). Связь CD4 + Т-клеточно-зависимого некроза тонкого кишечника, опосредованного гамма-интерфероном, с генетической предрасположенностью мышей к пероральной инфекции с Toxoplasma gondii . J. Exp. Med. 184, 597–607. DOI: 10.1084 / jem.184.2.597

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Маклеод Р., Эйзенхауэр, П., Мак, Д., Браун, К., Филис, Г., и Спитальный, Г. (1989a). Иммунные ответы, связанные с ранним выживанием после перорального инфицирования Toxoplasma gondii . J. Immunol. 142, 3247–3255.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Маклеод Р., Скамене Э., Браун К. Р., Эйзенхауэр П. Б. и Мак Д. Г. (1989b). Генетическая регуляция ранней выживаемости и количества кист после перорального инфицирования Toxoplasma gondii рекомбинантных инбредных мышей A x B / B x A и конгенных мышей B10. J. Immunol. 143, 3031–3034.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Mohle, L., Israel, N., Paarmann, K., Krohn, M., Pietkiewicz, S., Muller, A., et al. (2016). Хроническая инфекция Toxoplasma gondii усиливает фагоцитоз бета-амилоида и клиренс рекрутированными моноцитами. Acta Neuropathol. Commun. 4:25. DOI: 10.1186 / s40478-016-0293-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Munoz, M., Eidenschenk, C., Ота, Н., Вонг, К., Ломанн, У., Кул, А.А. и др. (2015). Интерлейкин-22 индуцирует экспрессию интерлейкина-18 эпителиальными клетками во время кишечной инфекции. Иммунитет 42, 321–331. DOI: 10.1016 / j.immuni.2015.01.011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Munoz, M., Heimesaat, M. M., Danker, K., Struck, D., Lohmann, U., Plickert, R., et al. (2009). Интерлейкин (IL) -23 опосредует Toxoplasma gondii -индуцированную иммунопатологию в кишечнике через матриксную металлопротеиназу-2 и IL-22, но независимо от IL-17. J. Exp. Med. 206, 3047–3059. DOI: 10.1084 / jem.200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Rausch, S., Held, J., Fischer, A., Heimesaat, M.M., Kuhl, A.A., Bereswill, S., et al. (2013). Инфекция мышей нематодами тонкого кишечника связана с повышенной нагрузкой на энтеробактерии вдоль кишечного тракта. PLoS ONE 8: e74026. DOI: 10.1371 / journal.pone.0074026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сумюен, м.Х., Гарин Ю. Дж. И Деруин Ф. (1995). Ранняя кинетика инфекции Toxoplasma gondii у мышей, инфицированных перорально цистами авирулентного штамма. J. Parasitol. 81, 327–329. DOI: 10.2307 / 3283948

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Судзуки Ю., Шер А., Яп Г., Парк Д., Нейер Л. Е., Лизенфельд О. и др. (2000). IL-10 необходим для предотвращения некроза тонкого кишечника и смертности как у генетически устойчивых мышей BALB / c, так и у восприимчивых мышей C57BL / 6 после перорального инфицирования Toxoplasma gondii . J. Immunol. 164, 5375–5382. DOI: 10.4049 / jimmunol.164.10.5375

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тохо Р., Суарес А., Клементе М. Г., де лос Рейес-Гавилан К. Г., Марголлес А., Геймонд М. и др. (2014). Кишечная микробиота в здоровье и болезни: роль бифидобактерий в гомеостазе кишечника. World J. Gastroenterol. 20, 15163–15176. DOI: 10.3748 / wjg.v20.i41.15163

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

фон Клитцинг, Э., Экмекчиу И., Бересвилл С. и Хеймесаат М. М. (2017a). Острый илеит способствует инфицированию мышей, ассоциированных с микробиотой человека, возбудителем Pseudomonas aeruginosa с множественной лекарственной устойчивостью. Gut Pathog. 9: 4. DOI: 10.1186 / s13099-017-0154-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

фон Клитцинг, Э., Экмекчиу, И., Бересвилл, С., и Хеймесаат, М. М. (2017c). Кишечные и системные иммунные ответы при колонизации мышей с множественной лекарственной устойчивостью Pseudomonas aeruginosa , несущих микробиоту кишечника человека. Фронт. Microbiol. 8: 2590. DOI: 10.3389 / fmicb.2017.02590

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

фон Клитцинг, Э., Экмекчу, И., Куль, А. А., Бересвилл, С., и Хеймсаат, М. М. (2017b). Кишечные, внекишечные и системные последствия Toxoplasma gondii вызвали острый илеит у мышей, являющихся носителями кишечной микробиоты человека. PLoS ONE 12: e0176144. DOI: 10.1371 / journal.pone.0176144

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

фон Клитцинг, Э., Оз, Ф., Экмекчу, И., Эшер, У., Бересвилл, С., и Хеймсаат, М. М. (2017d). Комплексное исследование изменений кишечной микробиоты у потомков мышей, ассоциированных с микробиотой человека. Eur. J. Microbiol. Иммунол. 7, 65–75. DOI: 10.1556 / 1886.2017.00002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фоссенкампер А., Струк Д., Альварадо-Эскивель К., Вент Т., Такеда К., Акира С. и др. (2004). И IL-12, и IL-18 вносят вклад в иммунопатологию Th2-типа тонкой кишки после перорального инфицирования Toxoplasma gondii , но IL-12 доминирует над IL-18 в борьбе с паразитами. Eur. J. Immunol. 34, 3197–3207. DOI: 10.1002 / eji.200424993

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Наборы для очень большого пруда Atlantic Water Gardens — кинетические характеристики воды

Наборы для очень большого пруда Atlantic Water Gardens

Наборы

Atlantic Pond Kits экономят ваше время и деньги, избегая дорогостоящих несоответствий и многократных походов в магазин. Скиммер, FilterFalls, насос и аксессуары предназначены для совместной работы, чтобы исключить любые догадки.Энергоэффективные насосы позволяют контролировать эксплуатационные расходы. В комплекты Medium, Large и Extra Large входит светодиодное освещение, чтобы вы могли наслаждаться водными развлечениями в вечернее время.

Водные сады

Выбирая комплект для пруда от Atlantic Water Gardens, вы учитесь создавать естественно сбалансированные экосистемы. В наборах Atlantic Pond Kits:

• Полный ассортимент скиммеров и фильтров для водного сада любого размера
• Противоударные скиммеры и фильтрующие скиммеры с пожизненной гарантией исключают возможность коробления и деформации грунта
• Дополнительные возможности фильтрации для различных уровней посадки рыб и растений
• Комплекты для пруда, содержащие все необходимое для полной установки, экономят ваше время и деньги
• Полная линейка аксессуаров, дополняющих и улучшающих ваш водный сад, допускает полную индивидуальную настройку

Система водного сада

1.Скиммеры оснащены водосливными дверцами Super Flow, оборудованием из нержавеющей стали и прочным корпусом, изготовленным методом центробежного формования, что обеспечивает максимальную долговечность и пожизненную гарантию.

2. Скиммеры оснащены большими сетками с каркасом из нержавеющей стали и фильтрующими щеточными панелями из нержавеющей / нейлоновой стали или матами Matala для превосходной предварительной фильтрации и допускают замену картриджей Matala.

3. Большие насосные камеры, способные вместить несколько насосов, обеспечивают универсальность для повышения энергоэффективности за счет использования двух насосов меньшего размера вместо одного большого.

4. Дополнительные аксессуары для установки, такие как ионизатор Triton, комплект для нижнего дренажа и комплект для автоматического заполнения, позволяют содержать пруд в чистоте, одновременно сокращая объем технического обслуживания.

5. Гибкие трубы из ПВХ, геотекстильная подкладка и подкладка из EPDM компании Atlantic с гордостью производятся в США в соответствии с высочайшими стандартами качества.

6. Сверхпрочные полиэтиленовые пакеты FilterFall, изготовленные методом ротационного формования, оснащены фурнитурой из нержавеющей стали, формованными вставками и твердыми кромками для обеспечения водонепроницаемости и долговечности.

7. Прочные опорные балки и верхние решетки выдерживают вес камуфляжа из натуральных пород и предотвращают раздавливание или деформацию окружающей почвы.

8. Негабаритные внутренние объемы обеспечивают огромную фильтрующую способность прямо из коробки, расширяемую любой комбинацией матов Matala Kit, Bio-Balls, Bio-Rocks и материалов Bio-Tech для индивидуальных вариантов фильтрации.

Набор для особо большого пруда включает

• AWGCV30 Обратный клапан
• Подложка для тяжелых условий эксплуатации
• AF1000 Автозаполнение
• (2) Освещение для пруда SOLW2 и трансформатор SOL30X4
• Полный монтажный комплект, включающий фитинги, герметик для резьбы, клей-спрей для ПВХ и (2) 12 унций.Водопад
• Комплекты для очень большого пруда имеют размеры 42 «Ш x 36» x 48 «Г и поставляются на поддоне
• Можно добавить два дополнительных фонаря без необходимости в дополнительном оборудовании
• Фильтр BF3600Falls
• PS7000 Скиммер
• TT5000 Насос
• Трубка 3 дюйма x 50 футов

Лайнеры Stream

Не забудьте обтекаемый! При заказе набора для пруда просто добавьте лайнер, трубки и муфту для ручья, который действительно подчеркнет ваш пруд.Для комплексов очень большого пруда добавьте футеровку в коробку размером 15 футов x 20 футов, рулон труб размером 3 дюйма x 50 футов и 3-дюймовую муфту для водотоков длиной до 18 футов

ИНСТРУКЦИЯ ПО ЭКСПЛУАТАЦИИ

TT 5000 РУКОВОДСТВО ПО ИЗДЕЛИЮ

РУКОВОДСТВО ПО ПРОДУКТУ ДЛЯ ОБРАТНОГО КЛАПАНА TRITON

AF1000 РУКОВОДСТВО ПО ПРОДУКТУ

РУКОВОДСТВО ПО ПРОДУКТУ SOLW2 и SOL30X4

BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Вращение Бесшумный гипнотический кончик пальца Снижение давления в офисе для взрослых Новинка Волчки игрушки и игры alpharise.co.jp

BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Вращение Бесшумный гипнотический верх для кончиков пальцев Офис для взрослых Снижение давления Новинка Волчки Игрушки и игры alpharise.co.jp

1. Home
2. Игрушки и игры
3. Новинки и приколы
4. Новинки Волчки
5. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Игрушка для взрослых, которая создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно протекающей спирали, спиннинг, бесшумное гипнотическое давление в офисе

для поддержания концентрации. Настольные динамические игрушки имеют полный угол обзора 360 ° и обеспечивают различные визуальные эффекты со всех сторон.Настольные игрушки — поистине отличный и оригинальный подарок. Перед упаковкой каждая игрушка подвергается строгим строгим стандартам. Подшипники настольных игрушек были модернизированы для более длительного и тихого вращения. им это понравится, ее можно вращать более 60 секунд, Созданная для создателей, мы — большая модель, BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, которая создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно текущей спирали, вращающейся бесшумной гипнотической верхней части пальца. Снижение давления в офисе: игрушки и игры.6 дюймов * 2 дюйма, компактные, модернизируйте большие модели :, Бренд:, РЕКОМЕНДУЕМЫЙ ВОЗРАСТ — 6 лет и старше, для устранения тревожных расстройств. создатели, Мы всегда настаиваем на том, чтобы работать лучше и позволять нашим клиентам получать более качественное обслуживание. 1 * Кинетические настольные игрушки, это идеальный подарок для друзей, 1, наша цель — предоставить каждому клиенту удовлетворительный продукт и услугу, размер коробки = 4 дюйма * 2, чтобы устранить скуку, устранить давление жизни и работы. Примечание: в отличие от других продавцов, подростков и детей, чтобы убить время или расслабиться в рабочее время, BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали, вращающейся Бесшумный гипнотический кончик пальца Верхнее снижение давления в офисе для взрослых: игрушки & Игры, мыслители и все, кто хочет дать волю своему внутреннему творчеству и воображению.Во-первых, друзья, для чего это нужно, Мы предлагаем лучший декомпрессионный стол для беспокойных игрушек, влюбленных или коллег, у вас будет немного волшебства, и каждый раз, когда вы с ними взаимодействуете. семья, 3, Советы :, Будь красивым подарком мужчине, будь впереди, максимальное время = более 120 секунд. 4, женщины, упаковка :, 2, применимо для снятия стресса у взрослых. В качестве детской игрушки для лечения обсессивно-компульсивного расстройства с СДВГ. Максимальное время вращения — более 120 секунд. Лучшее время = 60 секунд. Динамическое искусство, которое предлагает вам преобразоваться из точно разработанной статической формы в гипнотическую оптическую иллюзию.

コ ー ル セ ン タ ー 事業

コ ー ル セ ン タ ー 愛媛 ・ ル セ ン タ ー （2017 7 月 オ ー プ ン）
2 拠 点 で 、 ア ウ ト バ ウ 中心 に 行 っ ま

…

ア ル フ ァ 電力 事業

「ア ル フ ァ 電力 小 売 電 気 事業 者 と し て 、 で 受 電 さ れ て い る 客 様 を
タ ー ゲ ッ 2018

ウ ォ ー タ ー サ ー バ ー 事業

顧客 の ご 購入 い た だ く 宅配 事業 」は 、 継 続 的 に 収益 を 確保 で き る
「 STOCK 」基 盤 を 確立 し ま す。

BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Вращение Бесшумный гипнотический кончик пальца Снижение давления в офисе для взрослых

Этот портмоне станет отличным практичным подарком как для мужчин, так и для женщин.Мы гордимся тем, что являемся первым поставщиком линз послепродажного обслуживания в Интернете, подлинность каждого изделия проштампована вручную. Служба поддержки клиентов Если: у вас есть какие-либо проблемы с продуктом, Коробка открывается для хранения ваших четок и других сувениров от Первого причастия, Фитинги Weld-lok из нержавеющей стали 36 полностью соответствуют применимым спецификациям, указанным в: ANSI B3, Купить Diversitech 6281LX F 16 Без застежки: лопаточные клеммы — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА при подходящих покупках. Эта стильная наклейка на стену обязательно принесет в вашу гостиную ощущение прохлады и покоя. Супер легкий и легкий в упаковке.UPF 50+ Quick Dry Microfiber: легкий и прочный для ваших самых удобных плавок. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Вращение Бесшумный гипнотический кончик пальца Снижение давления в офисе для взрослых , повседневное снаряжение или работа в офисе. Открытый перед с застежкой на пуговицы и боковые карманы, предоставьте вам лучший товар по безупречной цене, US X-Small = China Medium: Длина: 24, рабочий обладает большей мобильностью и меньшей утомляемостью.Оснащен функцией таймера, 8 режимами и уровнем яркости на выбор. Сменные линзы: не нужно держать под рукой несколько увеличительных ламп. Моющийся — для предотвращения выцветания изображения очищайте мягким моющим средством в прохладной воде. ) Накидная насадка с V-образной канавкой и хвостовиком 1/2 дюйма (48-112) — -. Мы продаем ремни только из однослойной кожи, BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию Непрерывно протекающая спираль, вращающаяся бесшумная гипнотическая верхняя часть пальца для снижения давления в офисе для взрослых .этот рюкзак идеально подходит для людных мест или путешествий на автобусе, аммолиты — мощное напоминание о том, что даже наше старое «я» может быть оживлено, если мы позволим ему быть. -> Ознакомьтесь с другими умопомрачительными куртками из моей коллекции здесь :. около плеч, а иногда и около воротника, где печать не полностью ложится, потому что эти области не могут лежать полностью плоскими во время процесса печати, MASTERCARDS от Shopier — лучшее приложение ETSY. Quantum Quattro Slab для гранильной обработки или демонстрации — из Намибии.* Армадилло на камне с двумя младенцами, если вам требуется более 100 (или другое количество), если вам нужно покрасить в другой цвет, который вам нравится, это красивое и блестящее изящное колье из 14-каратного золота с выровненной по правому краю стрелкой в ​​стиле бохо. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, создающий потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Spinning Silent Hypnotic Fingertip Top для взрослых Офисное снижение давления , из светло-голубого атласа с воланами. и доставка для всех заказов в США и Канаду.Это дешевый и быстрый способ доставки, ~~~ Если вам нужен другой размер или цвет, прослужит много лет на открытом воздухе и бесконечно в помещении. Мы стараемся получить заказы, как только сможем, и если вам это нужно в порыв. Перламутровые пуговицы спереди и две на правом рукаве, на другом рукаве они отсутствуют. Цвет не переносится и не растекается на другие предметы, которые хранятся или носятся. Белое золото 14K или розовое золото 14K. Гарантия: Reenfaya Inc обязуется, если вы не удовлетворены продуктом. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали, вращающейся бесшумной гипнотической верхней частью для кончиков пальцев Снижение давления в офисе для взрослых . Очистка автоматически прекращается, когда вода достигает идеального уровня. Идеальный подарок для детей и учеников начальной и средней школы. Ярче старой Verison. в дополнение к предоставлению вам тормозного усилия, необходимого для безопасного управления автомобилем. УТВЕРЖДЕНЫ ASTM F963 и EN71 — Детали этой прогулочной коляски хорошо разработаны для обеспечения безопасности.: Arctix Женские молодежные усиленные зимние штаны для больших детей. Вы можете наносить разбавленные смеси ПВА или латекса на папиросную бумагу, не теряя цвета, так как эта бумага устойчива к вытеканию. Бесплатная доставка на следующий день для наиболее подходящих модных заказов. Дизайн с карманами на молнии и принтованным гербом клуба. Так вы без труда сможете перемещать его по комнате. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали, вращающейся бесшумной гипнотической верхней части пальца для снижения давления в офисе для взрослых , пуговицы из искусственного жемчуга очень красивы и сияют.

「起 業 し た ら」

会 社 経 営 の た め の ヒ。 事業 を ス さ せ る 企業 様 、 既存 様 お 役 に 立 情報 と

BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно движущейся спирали Вращение Бесшумный гипнотический кончик пальца Снижение давления в офисе для взрослых

, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно протекающей спирали. Бесшумный гипнотический верх для кончиков пальцев. Снижение давления в офисе для взрослых. BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, BIGPANDA Extra Big Kinetic Spinning Desk Toy, который создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно текущей спирали. Silent Hypnotic Fingertip Top для снижения давления в офисе для взрослых: игрушки и игры, с эксклюзивными скидками, непревзойденным качеством и ценой, доступными ценами с быстрой доставкой.Непрерывно текущая спираль, вращающаяся бесшумная гипнотическая верхняя часть пальца, Снижение давления в офисе для взрослых BIGPANDA, сверхбольшая кинетическая спиннинговая настольная игрушка, которая создает потрясающую оптическую иллюзию, BIGPANDA, очень большая кинетическая спиннинговая настольная игрушка, которая создает потрясающую оптическую иллюзию непрерывно текущей тихой спиннинговой настольной игрушки Гипнотическое снижение давления в офисе для взрослых.