Идентифицируйте системные платы Intel® для настольных ПК B2 и версии…
Intel выпустил новые номера mm и коды продуктов для всех плат с наборами микросхем Intel® серии 6 Express, основанными на степпинге B3. Коды новой продукции имеют суффикс B3, добавленный к коду текущей продукции.
Таблица ниже идентифицирует системные платы Intel® для настольных ПК, изменившиеся, и показывает коды новой продукции и номера AA платы, использующие степпинг B3. Более ранние версии номера AA используют набор микросхем B2.
| Системные платы Intel® для настольных ПК | SKU | Код новой продукции | Новая серверная плата AA# |
| DQ67SW | Единственное поле | BOXDQ67SWB3 | G12527-304 |
| С 10 пакетами | BLKDQ67SWB3 | G12527-304 | |
| DQ67OW | Единственное поле | BOXDQ67OWB3 | G12528-303 |
| С 10 пакетами | BLKDQ67OWB3 | G12528-303 | |
| DQ67EP | Единственное поле | BOXDQ67EPB3 | G12529-303 |
| С 10 пакетами | BLKDQ67EPB3 | G12529-303 | |
| DP67DE | Единственное поле | BOXDP67DEB3 | G10217-205 |
| С 10 пакетами | BLKDP67DEB3 | G10217-205 | |
| DP67BG | Единственное поле | BOXDP67BGB3 | G10491-303 |
| С 10 пакетами | BLKDP67BGB3 | G10491-303 | |
| DP67BA | Единственное поле | BOXDP67BAB3 | G10219-300 |
| С 10 пакетами | BLKDP67BAB3 | G10219-300 | |
| DH67GD | Единственное поле | BOXDH67GDB3 | G10206-204 |
| С 10 пакетами | BLKDH67GDB3 | G10206-204 | |
| DH67BL | Единственное поле | BOXDH67BLB3 | G10189-204 |
| С 10 пакетами | BLKDH67BLB3 | G10189-204 | |
| DH67CL | Единственное поле | BOXDH67CLB3 | G10212-204 |
| С 10 пакетами | BLKDH67CLB3 | G10212-204 | |
| DH67CF | Единственное поле | BOXDH67CFB3 | G10215-202 |
| С 10 пакетами | BLKDH67CFB3 | G10215-202 | |
| DB65AL | Единственное поле | BOXDB65ALB3 | G12530-304 |
| С 10 пакетами | BLKDB65ALB3 | G12530-304 | |
| DH61WW | Единственное поле | BOXDH61WWB3 | G23116-202 |
| С 10 пакетами | BLKDH61WWB3 | G23116-202 | |
| DH61DL | Единственное поле | BOXDH61DLB3 | G14066-202 |
| С 10 пакетами | BLKDH61DLB3 | G14066-202 | |
| DH61CR | Единственное поле | BOXDH61CRB3 | G14064-202 |
| С 10 пакетами | BLKDH61CRB3 | G14064-202 | |
| DH61BE | Единственное поле | BOXDH61BEB3 | G14062-203 |
| С 10 пакетами | BLKDH61BEB3 | G14062-203 |
Обратитесь к B3_Labels.pdf для просмотра изображений поля и наклеек, показав коды новой продукции.
Идентифицируйте неизвестные номера и блокируйте спам-сообщения с помощью Truemessenger для Android
Неизвестный номер: «Эй, как дела? Много времени!»
Вы: «Ммм хорошо. Извините, я не сохранил вас в моих контактах — кто это?
Неизвестный номер: «Что ?! Как ты можешь не иметь меня в своих контактах?
Звучит знакомо? Вы не хотите обидеть этого неизвестного человека, но вы ничего не можете с этим поделать. Спасите себя от румян и получите Truemessenger, новое приложение для замены текстовых сообщений для Android, которое идентифицирует неизвестные номера (и делает другие интересные вещи).
Каждый раз, когда новое бесплатное мобильное приложение обмена сообщениями
релизы, все начинают говорить о смерти смс. Тем не менее, обмен текстовыми сообщениями все еще огромен, и, эй, он никуда не денется. Truemessenger знает об этом и хочет улучшить ваше приложение для обмена сообщениями.
Truemessenger сделан людьми из Truecaller, телефонной книги из открытых источников. Ранее мы говорили, что Truecaller входит в десятку лучших приложений для Android, которые каждый должен установить первым.
, Проведя несколько часов с Truemessenger, мы считаем, что он также может быть в этом списке.
Что делает Truemessenger
Truecaller имеет две основные цели:
- Определите неизвестные номера.
- Фильтровать спам-сообщения
Выявление неизвестных номеров
Truemessenger использует базу данных телефонной книги Truecaller для сопоставления телефонных номеров людям. Вам понадобится активное подключение к Интернету, хотя. Truemessenger также предлагает вам установить его в качестве приложения по умолчанию в Android
, но в этом нет необходимости, если вы не хотите использовать его по умолчанию.
Во время тестирования я видел, как приложение получает имя для каждого неизвестного номера в моих текстовых сообщениях. По общему признанию, это была аномалия, поскольку у меня никогда не было такой удачи с Truecaller. Как и его родительское приложение, Truemessenger, вероятно, не будет работать каждый раз, но большую часть времени будет работать довольно точно.
Хотите добавить имя в свою телефонную книгу? Откройте сообщение, нажмите «Добавить в контакты», и вы попадете в любимое приложение контактов.
с уже заполненными полями имени и номера.
Кстати, вы, возможно, захотите попробовать родного Truemessenger Truedialer, который является фантастическим умным номеронабирателем для Android
,
Фильтрация спама
Спам в текстовых сообщениях — большая проблема, но, к сожалению, в большинстве приложений SMS для них нет спам-фильтра, подобного Gmail. Ну, Truemessenger здесь, чтобы изменить это.
При первом запуске приложения Truemessenger попросит вас отметить, что является спамом, а что нет. Потратьте время и доведите это до конца. Есть простая причина.
В моем случае я хочу текстовые сообщения из моего банка. Я не хочу, чтобы сообщения других банков рассылались спамом по поводу их кредитных карт или «выгодных кредитов». Выбрав ненужные банки и не выбрав мой банк, Truemessenger понял, что я хотел. Когда я получил нежелательный текст спама из банка, он аккуратно отфильтровал сообщение в Спам. Я быстро провел онлайн-транзакцию (для которой я получаю текстовые оповещения), и это текстовое оповещение появилось в моем почтовом ящике. Отлично.
Помимо этой интеллектуальной фильтрации, вы можете в любой момент отправить сообщение в папку со спамом. Кроме того, Truemessenger также имеет настраиваемые фильтры спама, чтобы блокировать номер, блокировать последовательность цифр в любом номере телефона или блокировать отправителя по имени.
Просто в качестве меры, соедините это с некоторыми из наших советов, чтобы остановить тексты спама навсегда
,
Что не делает Truemessenger
Хотя Truemessenger отлично распознает неизвестные номера и фильтрует спам, ему все еще не хватает некоторых ключевых функций.
Слон в комнате: конфиденциальность
Когда вы запускаете Truemessenger, он запрашивает ваши основные данные для входа в систему: ваше имя, ваш номер телефона, ваш адрес электронной почты. Таким образом Truemessenger (и Truecaller) создает свою телефонную книгу. Он также запрашивает доступ к контактам пользователя, сопоставляя его с другими пользователями и создавая библиотеку телефонных номеров из открытых источников.
Вы можете выбрать, кто увидит эти данные: друзья друзей, только по запросу, или кто-либо в мире. Это степень вашего контроля конфиденциальности в Truemessenger или во вселенной Truecaller в целом. Это не одно из тех приложений для обмена сообщениями, которые серьезно относятся к вашей конфиденциальности
,
Помимо конфиденциальности, существует также проблема безопасности. Приложение читает все ваши текстовые сообщения, имеет доступ к вашим контактам и многое другое, о чем следует опасаться. К счастью, Truemessenger сообщил Techpp, что приложение обрабатывает данные локально и не передает сообщения на их серверы. Только номер отправителя передается на их серверы.
Может ли Truemessenger заменить ваше приложение для обмена сообщениями?
Да, вам следует установить Truemessenger. Но стоит ли сделать его вашим приложением для обмена сообщениями по умолчанию? Это зависит от того, как вы используете текстовые сообщения.
Если вы получаете много спама и с помощью неизвестных номеров в основном связываетесь по тексту, Truemessenger того стоит. Лично, это именно то, что я использую, так как я в основном использую WhatsApp с WhatsApp Web
говорить с людьми, которых я знаю. Если приложение обновляется с помощью быстрого ответа и обмена контактами, то, конечно же, оно может быть чьим-либо инструментом обмена сообщениями по умолчанию.
Однако, если обмен текстовыми сообщениями с вашей семьей и друзьями является важной частью вашей жизни, то вам лучше придерживаться одного из множества отличных приложений SMS для Android
, На самом деле, вы даже можете отправлять и проверять сообщения на вашем компьютере
с этими.
Как получить Truemessenger
Прямо сейчас приложение было выпущено только в индийском магазине Google Play, поэтому индийские пользователи могут легко установить его.
Загрузите Truemessenger (бесплатно) из магазина Google Play [больше не доступно]
Тем, кто находится за пределами Индии, необходимо загрузить APK и вручную установить его на свой телефон Android.
,
Скачать Truemessenger 1.0 APK from APK-DL
Вам нравятся приложения Truecaller? Почему или почему нет?
В этом выпуске собраны три основных приложения для телефона от Truecaller: вызывающий абонент в форме Truedialer, обработчик SMS в форме Truemessenger и оригинальное приложение для идентификации вызывающего абонента — Truecaller.
Используете ли вы приложения из семейства Truecaller? Вы согласны с проблемами конфиденциальности в качестве компромисса для их удобства? Дайте нам знать об этом в комментариях!
Помощь студентам в учёбе от Людмилы Фирмаль
Здравствуйте!
Я, Людмила Анатольевна Фирмаль, бывший преподаватель математического факультета Дальневосточного государственного физико-технического института со стажем работы более 17 лет. На данный момент занимаюсь онлайн обучением и помощью по любыми предметам. У меня своя команда грамотных, сильных бывших преподавателей ВУЗов. Мы справимся с любой поставленной перед нами работой технического и гуманитарного плана. И не важно: она по объёму на две формулы или огромная сложно структурированная на 125 страниц! Нам по силам всё, поэтому не стесняйтесь, присылайте.
Срок выполнения разный: возможно онлайн (сразу пишите и сразу помогаю), а если у Вас что-то сложное – то от двух до пяти дней.
Для качественного оформления работы обязательно нужны методические указания и, желательно, лекции. Также я провожу онлайн-занятия и занятия в аудитории для студентов, чтобы дать им более качественные знания.
У меня конфиденциальность и безопасность высокого уровня. Никто не увидит Ваше задание, кроме меня и моих преподавателей, потому что WhatsApp — это закрытая от индексирования система , в отличие от других онлайн-сервисов (бирж и агрегаторов), в которые Вы загружаете своё задание, и поисковые системы Yandex и Google индексируют всё содержимое файлов, и любой пользователь сможет найти историю Вашего заказа, а значит, преподаватели смогут узнать всю историю заказа. Когда Вы заказываете у меня — Вы получаете максимальную конфиденциальность и безопасность.
Моё видео:
Как вы работаете?
Вам нужно написать сообщение в WhatsApp (Контакты ➞ тут) . После этого я оценю Ваш заказ и укажу срок выполнения. Если условия Вас устроят, Вы оплатите, и преподаватель, который ответственен за заказ, начнёт выполнение и в согласованный срок или, возможно, раньше срока Вы получите файл заказа в личные сообщения.
Сколько может стоить заказ?Стоимость заказа зависит от задания и требований Вашего учебного заведения. На цену влияют: сложность, количество заданий и срок выполнения. Поэтому для оценки стоимости заказа максимально качественно сфотографируйте или пришлите файл задания, при необходимости загружайте поясняющие фотографии лекций, файлы методичек, указывайте свой вариант.
Какой срок выполнения заказа?Минимальный срок выполнения заказа составляет 2-4 дня, но помните, срочные задания оцениваются дороже.
Как оплатить заказ?Сначала пришлите задание, я оценю, после вышлю Вам форму оплаты, в которой можно оплатить с баланса мобильного телефона, картой Visa и MasterCard, apple pay, google pay.
Какие гарантии и вы исправляете ошибки?В течение 1 года с момента получения Вами заказа действует гарантия. В течении 1 года я и моя команда исправим любые ошибки в заказе.
Качественно сфотографируйте задание, или если у вас файлы, то прикрепите методички, лекции, примеры решения, и в сообщении напишите дополнительные пояснения, для того, чтобы я сразу поняла, что требуется и не уточняла у вас. Присланное качественное задание моментально изучается и оценивается.
Теперь напишите мне в Whatsapp или почту (Контакты ➞ тут) и прикрепите задания, методички и лекции с примерами решения, и укажите сроки выполнения. Я и моя команда изучим внимательно задание и сообщим цену.
Если цена Вас устроит, то я вышлю Вам форму оплаты, в которой можно оплатить с баланса мобильного телефона, картой Visa и MasterCard, apple pay, google pay.
Мы приступим к выполнению, соблюдая указанные сроки и требования. 80% заказов сдаются раньше срока.
После выполнения отправлю Вам заказ в чат, если у Вас будут вопросы по заказу – подробно объясню. Гарантия 1 год. В течении 1 года я и моя команда исправим любые ошибки в заказе.
Можете смело обращаться к нам, мы вас не подведем. Ошибки бывают у всех, мы готовы дорабатывать бесплатно и в сжатые сроки, а если у вас появятся вопросы, готовы на них ответить.
В заключение хочу сказать: если Вы выберете меня для помощи на учебно-образовательном пути, у вас останутся только приятные впечатления от работы и от полученного результата!
Жду ваших заказов!
С уважением
Пользовательское соглашение
Политика конфиденциальности
Рекомендации по безопасности при использовании WCF — WCF
- Чтение занимает 2 мин
В этой статье
В следующих разделах приводятся рекомендации по созданию надежных приложений с помощью Windows Communication Foundation (WCF). Дополнительные сведения о безопасности см. в разделах Вопросы безопасности, Вопросы безопасности для данных и Вопросы безопасности при использовании метаданных.
Идентифицируйте службы, проходящие проверку подлинности Windows, с помощью различных SPN.
Службы могут идентифицироваться с помощью имен участника-пользователя (UPN) или имен субъекта-службы (SPN). Службы, выполняемые от имени учетных записей компьютера (например, сетевые службы), имеют идентификатор SPN, который совпадает с идентификатором компьютера, на котором они выполняются. Службы, выполняемые от имени учетных записей пользователя, имеют идентификатор UPN, совпадающий с идентификатором пользователя, от имени которого они выполняются, при этом средство setspn может использоваться для назначения SPN учетной записи пользователя. Настройка службы, делающая возможной идентификацию службы через SPN, и настройка подключающихся к службе клиентов на использование этого SPN, затрудняют определенные атаки. Это правило действует для привязок, использующих согласование Kerberos или SSPI. Несмотря на это, клиенты должны указывать SPN в случае, если SSPI возвращается к NTLM.
Проверяйте удостоверения службы в WSDL
WS-SecurityPolicy позволяет службам публиковать информацию о своих удостоверениях в метаданных. Когда идентификационные данные извлекаются через svcutil или с помощью других методов, таких как WsdlImporter, эти данные преобразуются в параметры удостоверения для адресов конечных точек служб WCF. Клиенты, которые не подтверждают правильность и допустимость данных удостоверений службы, эффективно выполняют обход проверки подлинности службы. Вредоносная служба может использовать такие клиенты для перенаправления учетных данных и реализации других атак типа «злоумышленник в середине», изменяя заявленное в WSDL удостоверение.
Используйте сертификаты X509 вместо протокола NTLM
WCF предоставляет два механизма проверки подлинности одноранговых элементов: сертификаты X509 (используемые одноранговым каналом) и проверку подлинности Windows, при которой согласование SSPI понижается с протокола Kerberos до протокола NTLM. Проверка подлинности на основании сертификатов с использованием размеров ключа от 1024 битов имеет преимущества по сравнению с проверкой подлинности по протоколу NTLM по следующим причинам:
возможность взаимной проверки подлинности,
использование усиленных алгоритмов шифрования и
затруднение использования перенаправленных учетных данных сертификата X509.
Всегда отменяйте изменения после олицетворения
При использовании интерфейсов API, которые разрешают олицетворение клиента, не забудьте вернуться к исходной идентификации. Например, при работе с WindowsIdentity и WindowsImpersonationContext воспользуйтесь оператором C# using или оператором Visual Basic Using, как показано в следующем примере кода. Класс WindowsImpersonationContext реализует интерфейс IDisposable, следовательно, среда CLR автоматически возвращается к исходной идентификации после того, как код выводится из блока using.
WindowsIdentity identity = ServiceSecurityContext.Current.WindowsIdentity;
using (identity.Impersonate())
{
// Run code under the caller's identity.
}
Dim identity = ServiceSecurityContext.Current.WindowsIdentity
Using identity.Impersonate()
' Run code under the caller's identity.
End Using
Используйте олицетворение только при необходимости
Метод Impersonate класса WindowsIdentity позволяет осуществлять строгий контроль над использованием олицетворения. В этом заключается отличие от использования свойства ImpersonationOperationBehaviorAttribute, которое позволяет использовать олицетворение в рамках всей операции. По возможности контролируйте область применения олицетворения с помощью более точного метода Impersonate.
Убедитесь в надежности источника метаданных и в том, что метаданные не были злонамеренно искажены. Метаданные, полученные по протоколу HTTP, передаются открытым текстом и могут быть подделаны. Если в службе используются свойства HttpsGetEnabled и HttpsGetUrl, для загрузки данных по протоколу HTTPS используйте URL-адрес, предоставленный разработчиком службы.
Для предотвращения злонамеренного искажения метаданных, опубликованных службой, обеспечьте защиту конечной точки обмена метаданными с помощью безопасности на уровне транспорта или сообщений. Дополнительные сведения см. в разделе Публикация конечных точек метаданных и Практическое руководство. Публикация метаданных для службы с использованием кода.
Разрешите использование локального издателя
Если для данной привязки указаны адрес издателя и привязка, локальный издатель не применяется в конечных точках, использующих эту привязку. Клиенты, которые предполагают всегда использовать локальный издатель, должны убедиться, что они не используют такую привязку или что привязка изменена таким образом, что адрес издателя пуст.
Квоты на размер маркеров SAML
Когда маркеры Security Assertion Markup Language (SAML) сериализуются в сообщениях, то, независимо от того, выдаются ли они службой маркеров безопасности (STS) или предоставляются клиентами для служб как часть проверки подлинности, квота на максимальный размер сообщения должна быть достаточно большой, чтобы вместить маркер SAML и другие части сообщения. Как правило, по умолчанию квоты на размер сообщения являются достаточными. Впрочем, если большой размер токена SAML объясняется содержанием в нем сотни утверждений, может потребоваться увеличение квот для выделения места сериализованному токену. Дополнительные сведения о квотах см. в разделе Вопросы безопасности для данных.
Задайте параметру SecurityBindingElement.IncludeTimestamp значение True в пользовательских привязках
При создании пользовательской привязки следует задать параметру IncludeTimestamp значение true. В противном случае, если параметр IncludeTimestamp имеет значение false, а клиент использует асимметричный маркер на основе ключа, например, сертификат Х509, сообщение не будет подписано.
См. также
9. Идентифицируйте пункты стандарта, представляющие собой следующие положения:
комментарий (сообщение) — 4 б.
рекомендацию — 4б.
правило (инструкцию) — 4 б.
требование — 3 б.
Ответ на вопрос.
В данном стандарте можно привести следующие примеры форм положений:
— требование:
3.4.5 Цистерны должны быть окрашены в желтый цвет с черной полосой и оборудованы предохранительным кожухом над крышкой люка.
—правило (инструкция):
4.12 Разлитый метанол с поверхностей удаляют сухими опилками, которые подлежат сжиганию в отдельно отведенном месте, а место разлива промывают струей воды.
—рекомендация:
6. Методы анализа.
6.2 Общие указания
Допускается применение других средств измерения с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками, обеспечивающими точность и чувствительность, предусмотренную стандартом, а также реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.
—комментарий (сообщение):
4.3 Метанол по степени воздействия на организм человека относится к умеренно опасным веществам (3-й класс опасности) по ГОСТ 12.1.005. Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны — 5 мг/м , максимальная разовая концентрация в атмосферном воздухе населенных мест — 1 мг/м , среднесуточная — 0,5 мг/м .
Идентифицируйте пункты стандарта, обеспечивающие при их выполнении безопасность продукции для окружающей среды; безопасность для жизни; безопасность для здоровья; безопасность для имущества; качество продукции; техническую совместимость; взаимозаменяемость; единство измерений.
— безопасность –
Ответ на вопрос:
В данном стандарте можно привести следующие примеры пунктов, выполнение которых обеспечивает безопасность:
— безопасность продукции для окружающей среды;
4.13 Для защиты окружающей среды при изготовлении метанола должна быть предусмотрена герметизация технологического оборудования.
— безопасность для жизни;
4.3 Метанол по степени воздействия на организм человека относится к умеренно опасным веществам (3-й класс опасности) по ГОСТ 12.1.005. Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны — 5 мг/м , максимальная разовая концентрация в атмосферном воздухе населенных мест — 1 мг/м , среднесуточная — 0,5 мг/м .
— безопасность для здоровья —
4.4 Метанол обладает политропным действием с преимущественным воздействием на нервную систему, печень и почки. Обладает выраженным кумулятивным эффектом. Метанол представляет собой опасность, вплоть до смертельного исхода, при поступлении через желудочно-кишечный тракт. Острые отравления при вдыхании паров встречаются редко. Метанол обладает слабовыраженным местным действием на кожу, может проникать через неповрежденные кожные покровы (ПДУ загрязнения кожных покровов составляет 0,02 мг/см ).
Симптомы отравления — головная боль, головокружение, тошнота, рвота, боль в желудке, общая слабость, раздражение слизистых оболочек, мелькание в глазах, а в тяжелых случаях — потеря зрения и смерть.
4.7 Производственные и лабораторные помещения, в которых проводятся работы с метанолом, должны быть снабжены приточно-вытяжной вентиляцией и местной вентиляцией, соответствующими требованиям ГОСТ 12.4.021, обеспечивающими состояние воздуха рабочей зоны в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005.
4.9 Средства индивидуальной защиты: защитные очки по ГОСТ 12.4.013, резиновые перчатки по ГОСТ 20010, спецодежда и обувь по ГОСТ 12.4.103 в соответствии с типовыми отраслевыми нормами, утвержденными в установленном порядке.
При высоких концентрациях паров (выше ПДК) следует использовать фильтрующий промышленный противогаз марок А, М или БКФ по ГОСТ 12.4.121.
— безопасность для имущества;
3.4.1 Метанол заливают в специально выделенные железнодорожные цистерны без нижнего сливного прибора, автоцистерны, стальные бочки вместимостью 200 дм по ГОСТ 13950.
При транспортировании метанола водным транспортом используют специальные контейнеры.
Не допускается заливать метанол в оцинкованные емкости.
Требования к таре — в соответствии с ГОСТ 26319.
3.4.7 Метанол для электровакуумной промышленности упаковывают в соответствии с ГОСТ 3885 в бутыли и в бутылки из стекла, не содержащего бора, с притертыми или корковыми пробками, защищенными полиэтиленовой или полимерной пленкой, и транспортируют в соответствии с правилами перевозки опасных грузов в специально выделенных крытых вагонах.
Для упаковки может быть использована тара следующей вместимости: 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1; 2; 3; 10; 20 дм .
Упаковка в стальные бочки допускается только по согласованию с потребителем.
Налив метанола в тару должен проводиться под азотной подушкой.
— качество продукции –
Ответ на вопрос.
В данном стандарте можно привести следующие примеры пунктов, выполнение которых обеспечивает определённое качество продукции:
3.3 По физико-химическим показателям технический метанол должен соответствовать нормам, указанным в таблице 1.
— техническую совместимость –
Ответ на вопрос.
В данном стандарте выполнение требования пункта 3.4.1 и 3.4.7 обеспечивает техническую совместимость:
3.4.1 Метанол заливают в специально выделенные железнодорожные цистерны без нижнего сливного прибора, автоцистерны, стальные бочки вместимостью 200 дм по ГОСТ 13950.
3.4.7 Метанол для электровакуумной промышленности упаковывают в соответствии с ГОСТ 3885 в бутыли и в бутылки из стекла, не содержащего бора, с притертыми или корковыми пробками, защищенными полиэтиленовой или полимерной пленкой, и транспортируют в соответствии с правилами перевозки опасных грузов в специально выделенных крытых вагонах.
— взаимозаменяемость –
Ответ на вопрос.
В данном стандарте можно привести следующие примеры пунктов, выполнение которых обеспечивает взаимозаменяемость:
B.3 Аппаратура, реактивы, растворы… Допускается при приготовлении стандартного раствора использовать ацетон, при этом в мерную колбу вместимостью 100 см вносят 1,0000 г ацетона по ГОСТ 2603, доводят до метки метанолом, не содержащим карбонильных соединений. 1 см приготовленного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят до метки метанолом, не содержащим карбонильных соединений. 1 см этого стандартного раствора содержит 100 мкг карбонильных соединений (ацетона).
— единство измерений –
Ответ на вопрос.
6 Методы анализа… Допускаемая относительная суммарная погрешность результата анализа ±15% при доверительной вероятности = 0,95.
5. Идентифицируйте четыре столпа прокрастинации
5. Идентифицируйте четыре столпа прокрастинации
Foto: PantherMedia/Scanpix
Врага надо знать в лицо. Согласно результатам этого исследования, есть четыре основные причины прокрастинации или лени.
Во-первых, это низкая ценность задачи. Мы избегаем задач, которые не ценим — результаты выполнения которых нам кажутся или неважными, или неинтересными. Поэтому, чтобы выполнить задачу, ее надо сделать либо важной (установить жесткий дедлайн, например), либо интересной (начать соревноваться с самим собой на время, которое нужно для ее выполнения).
Во-вторых, это человеческая личность. К сожалению, склонности и особенности психики людей играют огромную роль в том, ленятся они или нет. Вы должны честно сказать себе, что сильно отвлекает вас от выполнения работы или задачи и найти способ бороться с этим — закрыть себе доступ к «ненужным» сайтам вроде инструмента StayFocusd, например. Или пересесть подальше от болтливой коллеги.
В-третьих, это ожидания. Доказано, что если задача кажется нам легко достижимой, мы охотнее беремся за ее выполнение. На какую просьбу вы откликнетесь охотнее — сорвать мальчику яблоко с дерево или собрать корзину яблок для старушки? Поэтому задачи должны быть «мелкими» по объему и ожидаемой трате на них времени.
В-четвертых, это страх провала. Страх провала, как и личность людей, играет огромную роль в стремлении отложить выполнение задачи «на потом». Универсального рецепта борьбы с этим нет — все зависит от ситуации и конкретных людей. Стоит лишь рассмотреть ту возможность, что если вы действительно боитесь приступать к выполнению своих рабочих обязанностей — возможно, вы не на своем месте. В этом случае вам надо бояться его потерять — эта простая мысль должна вас правильно мотивировать на то, чтобы взять, наконец, и просто попробовать. У страха, как известно, глаза очень велики, а реальность куда проще и приятнее.
Идентифицируйте птичку 🙂
-=OZZY=-
Вот, жена заохотила… Птичка размером чуть больше воробья.
Раскраска очень красивая, камуфлированная.
Вопрос — что за птиц?
OMGtime
чуеца мне, что зря заохотила…
spartan3344
Точно, зря…
Похож на козодоя.
Letum
Дрозд ИМХО, а может и не дрозд, но незачет явно.
pirotek
-=OZZY=-
Вопрос — что за птиц?
Случайно не на кустах смородины, калины или ещё чего птиц сидел ?
pirotek
Letum
Дрозд ИМХО.
Дрозд почти в 3 раза больше воробья))
Турыст
А не жаворонок енто? Изверги! Вам ворон (срулей, воробьев) мало??? Больше так не делайте
OMGtime
точно, в определителе оч на жаворонка похож. плохо товарисч, плохо…
Kotofei
Зажарить его и съесть. Чтоб не зря помер…
BANDITO_PISTOLETO
Мля, птицьку жалко, того ротственник!
svadim
НИЗАЧОТИЩЕ!!!
-=OZZY=-
Не, на козодоя не похож!
У козодоя на фото глаза огромные, а у этого — нет.
Не дрозд однозначно, дроздов я прекрасно знаю 😊
Птиц сидел в деревне на коньке крыши сарая, заохочен был случайно — рикошетом! Там видно на левом крыле выбиты пёрья…
Посмотрел фотки жаворонков — тоже мало сходства.
Заохочен был в Гродненской области Белоруссии.
Fr
Фигасе рикошет! Осторожней стреляйте, а то еще соседа в глаз заохотите…
-=OZZY=-
Fr
Фигасе рикошет! Осторожней стреляйте, а то еще соседа в глаз заохотите…
— Дай стрельнуть по птицу!
— 1. Не надо, он маленький; 2. все равно не попадешь.
— ПОПАДУ!
— ну на…
*бах_по_жезезному_коньку_крыши, *пиуууВЖЖЖЖЖ* (рикошет), *ШЛЕП_по_тушке*, куча пёрьев…
Занавес 😊
Примерно так было… ТБ соблюдено 😊
Kuzmich_90
Вертишейка помоему, еще раз убеждаюсь, что давать женщинам оружие низя
BANDITO_PISTOLETO
Дай стрельнуть по птицу!Афтар самому жалко было?
— 1. Не надо, он маленький; 2. все равно не попадешь.
— ПОПАДУ!
Вот также у меня взяли птичку сбили а я ночь заснуть не мог!
Самое интересное что от количества убитых каргетов настроение только повышается!
Турыст
Kuzmich 90
В точку!и про женщин тоже
-=OZZY=-
Kuzmich 90, похоже она! Спасибо!
Danila1377
Красивая какая. Жаль….
terem-andrejj
Яб такую не смог.
AntiDog
да ну Юр,дрянь какая то,не переживай))
MadAlex
Вот на днях заохотили в угодьях, кто-нить знает кто это?
Ateist
MadAlex
Вот на днях заохотили в угодьях, кто-нить знает кто это?
Галка это КМК.
Adoven
Галка, легко узнать.
Zhigane
MadAlex
Вот на днях заохотили в угодьях, кто-нить знает кто это?
А нах ты вообще по птицам стреляешь, если тебе даже галка незнакома? Или тебе без разницы во что?
MadAlex
ZhiganeА нах ты вообще по птицам стреляешь, если тебе даже галка незнакома? Или тебе без разницы во что?
Галку в первый раз в жизни вижу.
Сидела на дереве с карами в тени. Уронил двух каров, остальные сорвались, а это сидит, ну я её в горячке и уронил, так как силуэт похожий.
Zhigane
MadAlex
Галку в первый раз в жизни вижу.
Серьезно? Офигеть… Я спросил не к тому, что галку бить нехорошо (это спорно как раз). Просто мне казалось, что в минимальные знания человека, осмысленно бьющего птиц, знание о галке должно входить. То есть если он не знает галки, то в птицах не разбирается вообще, след., ему по ним встерлять не стоит вовсе =))
MadAlex
ну я её в горячке и уронил, так как силуэт похожий.
Бывает, да. Сам одну так шлепнул весной на помойке — против солнца не разобрал.
MadAlex
Да я на выходных уехал в сельскую местность, там много всяких птиц незнакомых))) Ворон почти нет, пытался снять бекаса — чисто из принципа, но до бекаса я похоже не дорос еще)))
С горя уложил нескольких соек — собакам по нраву пришлись 😉
А тут дерево с карами! да целых 4-6 штук, ну я их начал лупить что есть дури)))
Наблюдал КУРа в оптику) так он как чует что на него навели — сразу срывался) так и не сфотал ни разу, у него там гнездо видать)
das Tier
MadAlexУ меня вчера наоборот было- выбираю на дереве дрозда пожирнее из стайки, в этот момент монохромный орел помоек упал на ветку, разогнал всех дроздов и гордо уселся- почти ровно «в крест» прицела 😀 Секунды на 3, не больше.
так он как чует что на него навели — сразу срывался)
Кстати, как оказалось- легкая crosman pointed бьет монохромов не хуже, чем тяжелая domed.
Табаки
das Tier
Кстати, как оказалось- легкая crosman pointed бьет монохромов не хуже, чем тяжелая domed.
Дык! С маломощных тока ими. Летят не хуже экзактов, а вместо шлепка и синяка на тушке, сопровождающимся протяжным таким кря-а-а-а, аккуратная такая дырочка.
Заметил, что после них фраги любят немного и недолго(метров 10-30) полетать.
Еще есть кросман дестроер. Тоже вещь. Удивительно кучная пулька. Стрелял метров на 30. Не хуже ЖСБ предатора. Чиза, 237 килопарсеков/год капехой.
Adoven
TierТут каждому — свое. Мне нравится например легкую из Тени 1000 пускать. И на ближних кулек и на дальних тоже самое.
Кстати, как оказалось- легкая crosman pointed бьет монохромов не хуже, чем тяжелая domed.
mihail.su
что, вороны и врановые остальные перевелись на руси великой? палим по «незачетам»?!а такая хорошая идея была, что кроухантинг спасает таких птичек!
все обс.. рали!)))))))
надо вуман обьяснить, что сначала смотрим куда и в кого стреляем, а уж потом нажимаем курок!
vovan77777
а уж потом нажимаем курок!на спусковой крючок!
das Tier
ТабакиУгу, у меня как раз маломощный ИЖшисятПЦП, ровно 7.499 джоулей 😀
Дык! С маломощных тока ими.
Определение идентификации по Merriam-Webster
Iden · ti · fy | \ ī-ˈden-tə-fī , ə- \переходный глагол
б : для определения таксономического положения (биологического образца)
2а : мыслить как единое целое (как по духу, мировоззрению или принципу) группы, которые идентифицированы с сохранением
Определите синонимы, определите антонимы | Тезаурус Мерриам-Вебстера
1 выяснить или установить личность- достаточные судебно-медицинские доказательства, позволяющие следователям идентифицировать преступника
- почему-то он всегда идентифицировал цвет красный с цветами
IDENTIFY Синонимы: 31 Синонимы и антонимы для IDENTIFY
Есть много хороших синонимов для identify — какой из них использовать, зависит от того, что именно вы хотите иметь в виду.Вот некоторые из основных:
- распознавать — чтобы иметь возможность сказать, что что-то такое (и часто узнать его название), например, в Он сразу же идентифицировал / узнал это как бабочку-монарх.
- диагностируют или точно определяют , как и в Мой механик, наконец, смог идентифицировать / диагностировать / точно определить проблему.
- ассоциирует , например, с определенной группой или верованием, как в Она известна тем, что отождествляет / ассоциируется с реформаторским крылом партии.
- различать , так как в Ее рост определил / отличил ее как волейболистку.
- установить (кто кто-то есть), так как в он был идентифицирован / установлен как главный подозреваемый. Соответственно, идентифицировать кого-то — значит выяснить, кто он, — установить его личность.
Иногда для идентифицировать каким-то образом означает рассматривать некоторую характеристику как неотъемлемую часть вашей личности (и, возможно, сделать это публично известным), например, в я идентифицирую как недвоичный или Она гордо называет себя мексиканкой-американкой .Другой способ выразить это — просто использовать формы глагола быть , так как в я недвоичный .
Отождествляют ли , а определяют синонимы ?
Да, идентифицируют и определяют, что могут быть синонимами, когда они означают то же самое, что диагностируют и определяют , среди прочего.
Означает ли , что идентифицирует , то же самое, что и список ?
Допустим, вы проходите тест, в котором вам предлагается идентифицировать Мировой океан.В этом случае, да, вы должны указать , чтобы их было . Конечно, если вас просят подойти к классу и идентифицировать их на карте, вас действительно просят продемонстрировать, что вы можете узнать их, указав на них (в отличие от , перечисляющего их. вслух или на бумаге).
Определить определение и значение | Словарь английского языка Коллинза
Примеры «идентифицировать» в предложении
идентифицировать
Эти примеры были выбраны автоматически и могут содержать конфиденциальный контент.Читать далее… Так почему до сих пор идентифицирован только один мир?Smithsonian Mag (2017)
Как определить лучшие?Times, Sunday Times (2016)
Они забрали камеру слежения, поэтому мы не можем их идентифицировать.Times, Sunday Times (2017)
Используя ключ, зритель может идентифицировать каждую из них.Times, Sunday Times (2016)
Определите проблему на одной неделе, решите ее на следующей.Times, Sunday Times (2016)
Поздравительная открытка, доставленная очень необычным способом, может идентифицировать вашего партнера судьбы.The Sun (2016)
Это способ определить, на какую ногу вы оказываете большее давление, и может означать, что вам нужны корректирующие тренажеры.Times, Sunday Times (2016)
Как сейчас футбол, цели уже определены, и агенты по телефону будут заняты работой над потенциальными сделками.Солнце (2016)
Она уже определила свою следующую задачу, когда вернется в Портсмут, город, где она сейчас живет.Times, Sunday Times (2016)
Это очень грубо, но когда вы так заняты, вы полагаетесь на свой инстинкт, чтобы идентифицировать больного человека в толпе.Times, Sunday Times (2017)
Подробнее …
В коже уже идентифицировано более десятка различных разновидностей клеток. только структура.Times, Sunday Times (2013)
Полиция отказалась назвать других или указать подробности их обвинений.Солнце (2015)
По ходу дела вы должны идентифицировать еще одну букву.Times, Sunday Times (2008)
Мы говорим об идентификации и взвешивании одной песчинки в пустыне.Ричард Форти ЗЕМЛЯ: Интимная история (2004)
Нам нужно использовать доступные иллюстрации, с которыми может себя идентифицировать обычный человек.Christianity Today (2000)
Один источник в хедж-фонде сказал, что его фирма уже определила дешевые возможности и вскоре будет инвестировать.Times, Sunday Times (2008)
Полиция быстро выявила виновных и задержала их.The Sun (2012)
Вы определили еще одну надвигающуюся проблему для осажденной автомобильной промышленности.Times, Sunday Times (2009)
Сильно обгоревшие тела были извлечены из обломков, но идентифицирован был только один.Times, Sunday Times (2013)
Как они могли без надежного способа их идентифицировать?ОТПЕЧАТКИ ПАЛЬЦЕВ Колина Бивана: убийство и гонка за раскрытие науки идентичности (2002)
Но он уже определил их как важные факторы в своих планах продвижения по службе.The Sun (2007)
Полиция опознала мужчину по вещам, которые они нашли на его велосипеде.The Sun (2014)
Его цель — помочь учителям чутко обращаться с учениками, которые идентифицируют себя как другой пол или ни один из них.Times, Sunday Times (2016)
Запланируйте посмотреть один из них сегодня вечером и определите «универсальные» плохие чувства, содержащиеся в нем.О’Киф, Джон Твой путь к умственному здоровью за одну неделю (1994)
Неспособность найти новые способы выявления и передачи знаний и опыта немыслима.Times, Sunday Times (2006)
Полиция идентифицировала две из трех машин, использовавшихся в качестве средств передвижения для бегства.Times, Sunday Times (2009)
Другой способ определения групп — это светлые или темные цвета.Freeman, Michael Photographers Handbook (1993)
Были предприняты попытки идентифицировать их, и было неясно, как они умерли.Times, Sunday Times (2013)
Там, где тема потери возникает без особого внимания, следует побудить человека идентифицировать потери.Пирсон, Алтея растет через потери и горе (1994)
Это требование, которое мы уже определили и прилагаем все усилия, чтобы закупить новую рубашку, которая отвечает всем требованиям.The Sun (2009)
Возможно, они определили не того человека или позволили старым воспоминаниям спутаться с тем, что они читали, слышали или о чем им рассказывали во время консультации.Times, Sunday Times (2016)
Но он уже выявил ряд проблем, в том числе необходимость сокращения очередей и улучшения внешнего вида почтовых отделений.Times, Sunday Times (2006)
идентифицируйте глагол — Определение, изображения, произношение и примечания к использованию
глагол Формы глагола| настоящий простой Я / ты / мы / они идентифицируют | |
| он / она / оно идентифицирует | |
| идентифицировано простое прошедшее время | |
| определено причастие прошедшего времени | |
| — форма, идентифицирующая |
(также неофициальный идентификатор)
, чтобы распознать кого-то / что-то и иметь возможность сказать, кто или что они такие- идентифицировать кого-то / что-то Она смогла идентифицировать нападавшего.
- Пассажиров попросили идентифицировать свои чемоданы перед посадкой в самолет.
- представьте себя Многие из арестованных отказались представиться (= не сказали, кто они такие).
- идентифицировать кого-то / что-то как кого-то / что-то. Были опознаны тела двух предполагаемых торговцев наркотиками.
- идентифицируют кого-то / что-то по чему-то двум видам водоплавающих птиц, которых можно идентифицировать по их отличительным клювам
- Все три сооружения датируются третьим веком и были предварительно идентифицированы как святыни.
- Правильно ли вы опознали все картинки?
- Я смогу легко его опознать, если увижу его снова.
- Хайме успешно идентифицировал все 45 различных видов.
- Большинство студентов не смогли определить цитату.
- Г-жа Уилсон была публично идентифицирована как агент ЦРУ.
- Газета отказалась назвать источник обвинений.
- точно
- правильно
- правильно
- …
- уметь
- быть не в состоянии
- может
- …
- попытки идентифицировать кого-то / Что-то
- средство идентификации кого-то / что-то
- способ идентификации кого-то / чего-то
- …
- близко
- полностью
- полностью
- …
- близко
- четко
- все больше
- …
- найти или обнаружить кого-то / что-то
- идентифицировать кого-то / что-то Прежде всего, мы должны определить проблемные области.
- Ученые определили ген, ответственный за заболевание.
- Покупателя компании пока не определили.
- для определения потребности / фактора / источника / причины
- определить, что, что и т. Д. Они пытаются определить, что не так в существующей системе.
- Эта система быстро определяет тенденции бизнеса.
- Он активизировал усилия по выявлению и приобретению других небольших компаний.
- Новый тест позволит нам более точно идентифицировать пациентов, которым грозит наибольший риск.
- Исследователи надеются найти способы улучшить лечение.
- компьютерная программа для автоматической идентификации любого запроса, заканчивающегося вопросительным знаком.
- Мы еще не определили источник загрязнения.
- Ученые установили связь между диетой и раком.
- точно
- правильно
- правильно
- …
- иметь возможность
- не может
- может
- …
- попытки идентифицировать кого-то / что-то
- способ идентифицировать кого-то / что-то
- способ идентифицировать кого-то / что-то
- …
- близко
- полностью
- полностью
- …
- близко
- четко
- все больше
- …
- идентифицировать кого-то / что-то (как кого-то / что-то), чтобы можно было распознать, кто или что является кем-то / чем-то
- Во многих случаях одежда, которую носят люди, идентифицирует их как принадлежащих к определенной социальной группе SS.
- серийный номер, который однозначно идентифицирует диск
Word Originmid 17-го века. (в смысле «рассматривать как идентичное с»): от средневекового латинского идентификатора, от позднего латинского идентификатора (от латинского idem «тот же») + латинского -ficare (от facere «делать»).
- знают
- узнают
- имя
- выделяют кого-то / что-то
- идентифицировать, чтобы иметь возможность сказать, кто или что является кем-то / чем-то:
- Она смогла идентифицировать нападавшего.
- знать, чтобы иметь возможность сказать, кто или что есть что-то, когда вы это видите или слышите, потому что вы видели или слышали это раньше. Знать используется особенно, чтобы говорить о звуках, которые кажутся знакомыми, и когда кто-то признает качество или возможность того, что кто-то / Something представляет: я не мог видеть, кто говорит, но я знал голос. • Она узнает выгодную сделку, когда видит ее.
- узнавать, чтобы узнать, кто кто-то или что такое что-то, когда вы видите или слышите их / это, потому что вы видели или слышали их / это раньше:
- Я узнал его, как только он вошел в комнату.
- имя, чтобы назвать имя кого-то / чего-то, чтобы показать, что вы знаете, кто они такие:
- Имя жертвы еще не названо.
- сделать кого-то / что-то, чтобы суметь увидеть или услышать кого-то / что-то не очень четкое:
- Я мог просто различить фигуру в темноте.
- для идентификации / познания / распознавания кого-либо / чего-то по чему-то
- для идентификации / распознавания / имени кого-то / чего-то как кого-то / чего-то
- для идентификации / знания / распознавания / Выяснить, кто / что / как…
- , чтобы легко / с трудом / просто идентифицировать / распознать / разобрать кого-то / что-то
WordReference Словарь американского английского языка для учащихся Random House © 2021 i • den • ti • fy / aɪˈdɛntəˌfaɪ, ɪˈdɛn- / USA произношение v., -fied, -fy • ing.
Полный словарь американского английского WordReference Random House © 2021 i • den • ti • fy (ī den ′ tə fī ′, i den ′ -), США произношение v., -fied, -fy • ing. в.т.
в.и.
и • денти • фи́а • бил ′ и • ты , и • ден ′ ти • фи́а • бле • несс , н. i • den ′ ti • fi′er , n.
Краткий английский словарь Коллинза © HarperCollins Publishers :: идентифицировать / aɪˈdɛntɪˌfaɪ / vb (-fies, -fying, -fied) (в основном tr)
идентифицируемый прил. ‘ идентифицируют ‘ также встречается в этих записях (примечание: многие из них не являются синонимами или переводами): |
Идентификация останков короля Ричарда III
Расположение лабораторий
Все исследования ДНК с участием современных родственников проводились в Университете Лестера.Родственники по мужской линии были типизированы с использованием Promega PowerPlex Y23 и для SNP, определяющих основные европейские Y-гаплогруппы в Лестере, с подмножеством типирования, подтвержденным в Университете Поля Сабатье. Родственников по женской линии секвенировали на весь митохондриальный геном в Университете Лестера. ДНК была извлечена из древних зубов и костей в Йоркском университете и Университете Поля Сабатье в Тулузе. Библиотечная подготовка и целевое обогащение были выполнены в Йоркском университете.Одностороннее секвенирование 100 п.н. с использованием HiSeq 2000 (Illumina, CA, USA) выполняли в Copenhagen Sequencing Facility. Целевое секвенирование как современной, так и древней ДНК также проводилось на геномной технической платформе PlaGe (Genopole, Тулуза, Франция) и в лаборатории химии нуклеиновых кислот белков в Университете Лестера. Ниже мы приводим сокращенную версию используемых методов. Для каждого шага полную информацию можно найти в дополнительных методах. Подробности обширного генеалогического исследования, проведенного для этого проекта, можно найти в дополнительном примечании 2.
Сбор образцов
ДНК была выделена из образцов слюны современных родственников Ричарда III, и все участники были набраны с информированного согласия после обзора проекта Комитетом по этике исследований Университета Лестера.
Скелет 1 был раскопан и образцы взяты в чистых условиях 37 . У всех, кто участвовал в раскопках на участке Серых Монахов, в чистой лаборатории в Лестере, а также у всех, кто участвовал в лабораториях и лабораторных работах, были типизированы митохондрии, а у мужчин — Y-хромосомы.ДНК была извлечена из образцов слюны, и все участники были набраны с информированного согласия.
Извлечение ДНК из древних образцов
ДНК было извлечено из образцов зубов и костей (бедренной кости). Все процедуры были выполнены в специализированных лабораториях древней ДНК в Йоркском университете и Университете Поля Сабатье в Тулузе с соблюдением соответствующих мер предосторожности в отношении загрязнения. Были включены две заготовки экстракции, которые обрабатывались точно так же, как если бы они были экстрактами на протяжении всего процесса.ПЦР и библиотечные эксперименты также включали дополнительные холостые контроли.
Анализ полового типирования, выполняемый на скелете 1
Был использован новый разработанный анализ полового типирования, включающий праймеры ПЦР для совместной амплификации фрагмента SRY с гомологичными областями UTX и UTY. Этот анализ был разработан для обеспечения возможности совместной амплификации фрагментов SRY, UTX и UTY относительно небольшого размера из образцов, которые могут содержать деградированную ДНК 10 .
Анализ митохондриальной контрольной области скелета 1
Анализ гипервариабельных сегментов (HV1, HV2 и HV3) контрольной области мтДНК проводили путем амплификации и прямого секвенирования нескольких перекрывающихся фрагментов размером от 153 до 250 п.н. (http: // криминалистика.yonsei.ac.kr/protocol/mtDNA-midi-mini.pdf) 22 . Отобранные ампликоны использовали для клонирования продуктов ПЦР в лаборатории в Тулузе. Секвенирование проводили с использованием набора для циклического секвенирования Big-Dye Terminator V3.1 (Applied Biosystems) и капиллярным электрофорезом на генетическом анализаторе ABI Prism 3730 (Applied Biosystems) в лаборатории химии нуклеиновых кислот белков Университета Лестера или геномная техническая платформа PlaGe (Genopole).
Митохондриальный геном / Y-SNP / HIrisplex типирование скелета 1
Библиотеки были созданы после Мейера и Кирхера 16 , за исключением того, что первый этап фильтрации между репарацией тупого конца и лигированием адаптера был заменен тепловой инактивацией ферменты 38,39 .Были разработаны два микрочипа: один для обогащения мтДНК, а другой — для обогащения ядерных SNP. Обогащение ДНК проводили гибридизационным захватом с использованием микрочипа Agilent 244k DNA SureSelect (Agilent, Böblingen, Германия). Для ядерного захвата были разработаны зонды Y-хромосомы, чтобы охватить SNP, относящиеся к основным европейским линиям 14 . Были разработаны дополнительные зонды для охвата SNP, относящихся к маркерам HIrisplex 31 . Эти два набора зондов (митохондриальные и SNP) использовались отдельно для заполнения двух различных дизайнов микрочипов формата 1 × 244K.Для каждого микрочипа протокол захвата был выполнен в соответствии с Hodges et al. 15 с модификациями, предложенными Zhang et al. 40 и Фортес и Пайджманс 38 . Библиотеки объединяли в эквимолярных количествах и секвенировали на двух дорожках платформы Illumina HiSeq 2000 в режиме 100 SE на установке для секвенирования Копенгагенского университета, Дания.
Необработанные считывания из каждой библиотеки были отсортированы на основе шестинуклеотидного индекса, использованного при подготовке библиотеки.Для дальнейшего анализа были выбраны только чтения со 100% совпадением с индексом. Считывания короче 25 нуклеотидов исключались из дальнейшего анализа. Обрезанные считывания были сопоставлены с аутосомами и половыми хромосомами из эталонной сборки генома человека 37 (GRCh47) и с rCRS (NC_012920.1) с использованием bwa 0.7.5a-r405 (ссылка 41). При каждом выравнивании выходные файлы bam были объединены с помощью SAMtools 0.1.19 (ссылка 41), а дубликаты ПЦР впоследствии были удалены. Отображенные чтения были отфильтрованы на основе качества отображения> 29 и их сопоставления с уникальными положениями вдоль эталонной последовательности.
Полиморфные позиции были идентифицированы с помощью SAMtools (SAMtools 0.1.19) и bcftools. Наконец, vcfutils.pl использовался для фильтрации списка вариантов в соответствии с апостериорным качеством вероятности генотипа по шкале Phred> 20 и глубиной чтения выше 10. Чтобы избежать ошибочного вызова из-за структуры дезаминирования древних молекул ДНК, все полиморфные позиции сообщенные в выходном файле vcf были проверены на глаз. В случае митохондриального генома сборка с эталоном была визуализирована в Таблице 42 , в то время как выравнивание считываний, содержащих SNP, с эталонными хромосомами было визуализировано с использованием IGV 43 .
Типирование SNP с помощью ПЦР
Подход с захватом дал недостаточное покрытие для всех SNP HIrisPlex и Y-хромосомы, и поэтому были разработаны праймеры для генерации ампликонов, содержащих эти SNP, а также двух SNP, которые дополнительно определяют гаплогруппу G Y-хромосомы: M285 ( G1) и P287 (G2) (ссылка 14). Они были усилены как часть мультиплексных реакций после Römpler et al. 44 или одноплексных реакций (с использованием 40 циклов и без вторичной амплификации) и секвенировали на Ion Torrent после подготовки библиотеки с использованием набора шаблонов Ion PGM 200 Xpress и набора для секвенирования PGM 200.Для увеличения охвата проводили одноплексную ПЦР и секвенирование одного маркера (rs28777) в соответствии с Binladen et al. 45
Типирование SNP, определяющих гаплогруппу G (M201, M285 и P287), было повторено в Тулузе с использованием одноплексной ПЦР. Секвенирование этих продуктов ПЦР проводили с использованием набора для циклического секвенирования Big-Dye Terminator V3.1 (Applied Biosystems) и анализировали капиллярным электрофорезом на генетическом анализаторе ABI Prism 3730 (Applied Biosystems) на геномной технической платформе PlaGe (Genopole).
Анализ гаплотипов Y-хромосомы
Древние и современные образцы Гаплотипы Y-хромосомы были получены с помощью системы PowerPlex Y23 (Promega) и проанализированы с помощью капиллярного электрофореза на генетическом анализаторе ABI Prism 3730 (Applied Biosystems) на геномной технической платформе PlaGe (Genopole) и на генетическом анализаторе ABI Prism 3130xl (Applied Biosystems) в Университете Лестера. Для Скелета 1 это было выполнено на трех отдельных экстрактах (RM2, LM1 и LM3) в двух разных лабораториях древних ДНК (Йорк и Тулуза).Для современных родственников это было выполнено на двух разных экстрактах в двух разных современных лабораториях (Лестер и Тулуза).
Анализ SNP Y-хромосомы современных образцов
После определения Y-гаплотипа для современных образцов мужской линии предсказанная гаплогруппа была определена с использованием предиктора гаплогрупп Уита Эти (http://www.hprg.com/hapest5/ hapest5a / hapest5.htm? order = num). Бинарные маркеры, покрывающие эти и родственные клоны, были типизированы в двух мультиплексах с помощью процедуры минисеквенирования SNaPshot (Applied Biosystems) и генетического анализатора ABI3130xl (Applied Biosystems) с последующим подтверждением с использованием секвенирования по Сэнгеру.Somerset 3 был определен как полученный Hg I (M170 + M223-, M253-) 14 , что дополнительно подтверждено лабораторией в Тулузе. Сомерсеты 1,2,4 и 5 были определены как производные для R1b-U152. Somersets 1,2,4 и 5 были протестированы на SNP, делящие эту кладу 13 (Z56, M126, Z36, Z192, M160 и L2) с использованием секвенирования по Сэнгеру в обеих лабораториях.
Современный анализ мтДНК
Оба образца были воспроизведены дважды.
Образцы были взяты с использованием наборов для сбора ДНК Oragene (DNA Genotek), и ДНК экстрагирована двумя различными методами: протоколом Qiacube Blood and Body Fluid (200 мкл при элюировании 200 мкл) и протоколом Oragene.Для анализа контрольной области образцы секвенировали дважды как в прямом, так и в обратном направлении с использованием двух перекрывающихся наборов праймеров (15973-296 и 16524-614) с использованием Big-Dye Terminator V 3.1 (Applied Biosystems). Никаких различий между повторами или между образцами обнаружено не было.
Образцы были амплифицированы для получения полного митохондриального генома из обеих экстракций согласно Meyer et al. 26 ампликонов ПЦР секвенировали на секвенсоре Ion Torrent PGM на чипе Ion314.Библиотеки были подготовлены с использованием набора для подготовки библиотеки фрагментов гДНК Ion Xpress Plus, в то время как подготовка матрицы и секвенирование выполнялись с использованием набора шаблонов Ion PGM 200 Xpress и набора для секвенирования Ion PGM 200 соответственно. Необработанные чтения были сопоставлены с rCRS (NC_012920.1) с помощью программного обеспечения TMAP, включенного в плагин Ion Alignment 3.2.1 (Torrent Suite Software 3.2.1) на сервере Ion Torrent. Удаление повторяющихся чтений и вызов вариантов выполнялись с помощью SAMtools 0.1.19 (ссылка 41) и локальное выравнивание было выполнено с помощью набора инструментов анализа генома 46 . Варианты сайтов были отфильтрованы по базовому качеству 20, качеству картирования 50 и глубине охвата 30, после чего было сохранено 33 полиморфных сайта. Все эти сайты были вручную проверены и подтверждены секвенированием по Сэнгеру в обоих направлениях и дважды реплицированы.
Контроль и количественная оценка загрязнения
Современное загрязнение древних останков ДНК контролировалось следующими методами:
- 1
Земляные работы проводились в чистых условиях (см. Дополнительные методы)
- 2
Образцы хранились в чистых лабораториях, а работа с древней ДНК проводилась только в специально отведенных для этого помещениях.
- 3
Отдельные древние образцы были обработаны в отдельных лабораториях для воспроизведения результатов.
- 4
Всем членам лаборатории и участникам раскопок типизировали их мтДНК, и типирование Y-хромосомы было проведено у всех вовлеченных мужчин.Ни один из них не имел подходящего типа мтДНК или Y-хромосомы.
В качестве доказательства против значительного загрязнения, анализ ДНК скелета 1 показывает полное совпадение мтДНК с ML1 и различие по одному основанию с ML2. Он также показывает четкий гаплотип Y-STR, который был воспроизведен с использованием ряда экстрактов, созданных и протестированных в двух отдельных лабораториях. Наконец, проверка (см. Дополнительные методы) шаблона подстановки в наших чтениях также подтверждает это.
Статистический анализ
Используя консервативный подход на каждом этапе, мы вычислили вероятность для каждого элемента наблюдаемых свидетельств при каждой из двух противоположных гипотез: Гипотеза 1 (h2): Скелет 1 — Ричард III, и Гипотеза 2 (h3): Скелет 1 — это не Ричард III.
Поскольку было разумным предположить, что все различные линии доказательств были независимыми, совокупная вероятность всех доказательств была получена путем умножения индивидуальных правдоподобий по каждой гипотезе.Вес доказательств для h2, называемый отношением правдоподобия (LR), был затем задан отношением правдоподобия при h2 к правдоподобию при h3. Мы говорим, что предположение «консервативно», если оно снижает LR.
LR можно преобразовать в вероятность того, что h2 истинно, с учетом априорной вероятности. Мы взяли за отправную точку момент, когда Скелет 1 был впервые обнаружен и признан человеческим скелетом, но до того, как были сделаны какие-либо оценки возраста, пола, состояния здоровья и причины смерти. На тот момент имелись веские доказательства того, что скелет, найденный в месте, где предположительно располагался хор Лестерских серых монахов, мог принадлежать Ричарду III.Вся информация, доступная во время раскопок Скелета 1, включая его точное местоположение и характер могилы, рассматривалась для этого анализа как справочная информация, которая может сообщить априорную вероятность. На основе этой информации мы полагаем, что скептически настроенный наблюдатель не мог обоснованно присвоить априорную вероятность менее 1 из 40. Это значение было предложено в предыдущем анализе (http://rationalgareth.com/) на основании того, что мы Судить по оценкам скептически.Наибольшая вероятность, которая может быть оправдана предыдущими доказательствами, может быть 1 из 2.
Мы использовали соответствующие доступные данные, где это возможно. Неизбежно требуются субъективные суждения, например, о соответствующих контрольных группах населения и о вероятностях ошибки в сообщаемых фактах. Насколько это казалось возможным и разумным, мы стремились быть консервативными в нашем подходе, например, используя метод псевдосчета для смещения LR к нейтральному значению 1, таким образом, стремясь избежать ложных больших значений из низких наблюдаемых частот.Подробная информация о данных и методах, используемых при статистическом анализе радиоуглеродных данных, возрасте и поле скелета, наличии сколиоза, наличии перимортальных ран, данных о частоте Y-хромосомы и мтДНК, может быть найдена в дополнительных методах. Подводя итог: данные радиоуглеродного анализа дали отношение правдоподобия 1,84, что соответствует ограниченной поддержке h2. Данные о возрасте и поле дали отношение правдоподобия 5,25, что опять же представляет ограниченную поддержку h2. Наличие одного плеча выше другого, о котором сообщалось при жизни Ричарда, может быть связано со сколиозом (у Скелета 1 был тяжелый идиопатический сколиоз в подростковом возрасте) или двумя другими известными состояниями, параличом Эрба и деформацией Шпренгеля, которые встречаются очень редко.При значении h2 указанные выше показатели дают оценочную вероятность наблюдения сколиоза в 0,90 с учетом описания внешнего вида Ричарда III (= частота сколиоза, деленная на сумму трех показателей), которую мы умножили на 0,95, чтобы учесть возможность того, что записанное описание было неверным. Это привело к LR 212, обеспечивая умеренно сильную поддержку h2. Присутствие перимортальных повреждений дало LR 42, что означает умеренную поддержку h2. Y-хромосома скелета 1 не соответствовала генеалогически определенным родственникам Ричарда III по отцовской линии.Это можно объяснить ложным отцовством в одной или нескольких из 19 предполагаемых связей отца и сына между Ричардом III и Генри Сомерсетом, пятым герцогом Бофортом. Результаты по Y-хромосоме также указывают на еще одно событие ложного отцовства между Генри Сомерсетом и его пятью современниками, предположительно патрилинейными потомками. Чтобы быть консервативными, мы выбрали опубликованный уровень ложного отцовства, который был (1) ниже, чем любой другой опубликованный показатель, который мы рассмотрели 17,47 и (2) на основе генеалогических данных 18 .К этому мы добавляем случай ложного отцовства в 19 предполагаемых связях отца и сына между Генри Сомерсетом и пятью современными мужчинами Сомерсетами. Это дает вероятность по крайней мере одного ложного отцовства из 19 предполагаемых связей отца и сына между Ричардом III и Генри Сомерсетом 0,16. Учитывая, что событие ложного отцовства должно было произойти при h2, популяционная частота Y-гаплотипа скелета 1 одинакова для h2 и h3 и исключается при вычислении LR. Таким образом, LR составляет 0,16, что представляет ограниченные доказательства против h2.
Последовательности мтДНК скелета 1 и предполагаемого 19-мейозного матрилинейного родственника Ричарда III, Майкла Ибсена, полностью совпадали. Родственник с 21-мейозом также совпал, за исключением одного основания (8994). Последнее наблюдение одинаково вероятно при h2 и h3, учитывая наблюдаемую последовательность Майкла Ибсена, и поэтому сокращается в LR. Таким образом, нам нужны только вероятности для наблюдения последовательности, разделяемой Майклом Ибсеном и Скелетом 1.
Чтобы получить вероятность при h2, нам нужна частота мутаций мтДНК, и в этом случае высокие оценки являются консервативными.Parsons et al. 28 сообщают о 10 мутациях контрольной области в 327 поколениях с использованием генеалогических данных. Поскольку это предполагает более высокую частоту, чем другие опубликованные оценки, и основано на генеалогических данных, мы использовали его, чтобы получить вероятность 0,52 для отсутствия мутации в 19 мейозах.
Для правдоподобия ниже h3 нам требуется фракция населения гаплотипа Скелета 1. Хотя мы получили полную последовательность генома мтДНК из скелета 1, мы выявили мало опубликованных данных сравнения полных геномов из Англии.Таким образом, для статистического анализа мы использовали только контрольные области мтДНК между положениями 16 093 и 16 320 и между 00073 и 00188, для которых мы получили подходящие данные сравнения на английском языке из обновления Röhl et al. 30 , дополненных последовательностями мтДНК, предоставленными Roots for Real (Genetic Ancestor Ltd., Clare, Suffolk, UK). Использование только этих коротких участков контрольной области под h3 является консервативным, поскольку популяционная доля наблюдаемых последовательностей контрольной области не может быть меньше, чем у полного генома мтДНК.Соответствующая эталонная популяция насчитывает более 500 лет в прошлом, но из-за большого размера популяции за рассматриваемый период мы ожидаем, что частота популяций за последние пять веков изменилась незначительно. Мы обнаружили, что частота гаплотипа Скелета 1 равна 0 среди 1823 в базе данных, к которой мы добавляем один случай, наблюдаемый у Майкла Ибсена. Этот подход, опять же, консервативен, поскольку Майкл был выбран из-за его известной генеалогической связи с Ричардом III. Это приводит к LR, равному 478, что представляет собой умеренно сильное доказательство существования h2.
Мы также отметили отсутствие совпадений в базе данных из 26 127 гаплотипов контрольных митохондриальных регионов Европы (www.empop.org) 29 . Мы не полагаемся на эту базу данных, потому что она общеевропейская, а не специфическая для Англии, и из-за проблем с установлением, но она предполагает, что гаплотип Скелета 1 может быть намного реже, чем можно вывести из нашей меньшей английской базы данных. Мы также отмечаем, что мобильность женщин среди европейской знати, вероятно, была намного выше, чем среди населения в целом, из-за брачных практик, связанных с формированием политических союзов.Такая практика дала бы некоторое оправдание для использования европейской базы данных мтДНК и, следовательно, для рассмотрения гаплотипа, обнаруженного в Скелете 1 и Майкле Ибсене, как чрезвычайно редкий. В дополнительной таблице 10 мы показываем некоторые иллюстративные результаты с использованием европейской базы данных, чтобы продемонстрировать последствия установления того, что гаплотип скелета 1 является столь же редким, как предполагает эта база данных.
LR для различных комбинаций свидетельств и двух апостериорных вероятностей показаны в дополнительной таблице 10.